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熒光分析,時(shí)間分辨熒光分析

來源:整理 時(shí)間:2023-08-19 19:06:08 編輯:智能門戶 手機(jī)版

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1,時(shí)間分辨熒光分析

上面弄錯(cuò)了,應(yīng)該是 http://www.docin.com/p-75208811.html

時(shí)間分辨熒光分析

2,什么叫熒光X射線

熒光,顧名思義就是在光的照射下發(fā)出的光。熒光X射線就是被分析樣品在X射線照射下發(fā)出的X射線,不同元素的熒光X射線具有各自的特定波長,因此根據(jù)熒光X射線的波長可以確定元素的組成,也就是它包含了被分析樣品化學(xué)組成的信息。
x熒光: 根據(jù)色散方式不同,分為x射線熒光光譜儀(波長色散)和x射線熒光能譜儀(能量色散)。 多用于rohs指令檢查,定量級別ppm

什么叫熒光X射線

3,XPS和EDX有什么區(qū)別

EDS是能譜分析,EDX是熒光分析,EDXRF是能量色散型熒光X射線,目前有害物質(zhì)分析儀和一些鍍層厚度分析儀利用此原理。EDS,( 電子差速鎖)英文全稱為ElectronicDifferentialSystem, 它是ABS的一種擴(kuò)展功能,用于鑒別汽車的輪子是不是失去著地摩擦力,從而對汽車的打滑車輪進(jìn)行控制。另有an HP company 是全球信息服務(wù)業(yè)領(lǐng)導(dǎo)者之一,以協(xié)助全球客戶提高企業(yè)的運(yùn)營績效。另有EDS (能譜,Energy Dispersive Spectrometer),EDS電氣設(shè)計(jì)軟件包。EDX:Energy Dispersive X-Ray Spectroscopy能量色散X射線光譜儀,也可簡寫為EDSEDX是借助于分析試樣發(fā)出的元素特征X射線波長和強(qiáng)度實(shí)現(xiàn)的, 根據(jù)波長測定試樣所含的元素,根據(jù)強(qiáng)度測定元素的相對含量。常用的EDX探測器是硅滲鋰探測器。當(dāng)特征X射線光子進(jìn)入硅滲鋰探測器后便將硅原子電離,產(chǎn)生若干電子-空穴對,其數(shù)量與光子的能量成正比。利用偏壓收集這些電子空穴對,經(jīng)過一系列轉(zhuǎn)換器以后變成電壓脈沖供給多脈沖高度分析器,并計(jì)數(shù)能譜中每個(gè)能帶的脈沖數(shù)。

XPS和EDX有什么區(qū)別

4,為什么熒光分析法的靈敏度比紫外可見分光光度法高

因?yàn)闊晒夥治龇▽儆诎l(fā)光分析 只有待測物分子可以發(fā)出指定波長的熒光 紫外-可見分光光度法是吸光光度法 除待測物之外 其它物質(zhì)也可能對入射光產(chǎn)生吸收 和波長沒有關(guān)系我剛讀研 做的就是熒光分析
因?yàn)闊晒饣蛄坠夥治龇ㄊ窃谌肷涔獾闹苯欠较驕y定熒光強(qiáng)度,即在黑背景下進(jìn)行檢測,因此可以通過入射光強(qiáng)度i或者增大熒光或者磷光信號的放大倍數(shù)來提高靈敏度,而紫外-可見法中測定的參數(shù)是吸光度,該值與入射光強(qiáng)度和透射光強(qiáng)度的比值相關(guān),入射強(qiáng)度增大,透射光強(qiáng)度也隨之增大,增大檢測器的放大倍數(shù)也同時(shí)影響入射光和透射光的檢測,因而限制了靈敏度的提高望采納
這是由于熒光分析法是在入射光直角方向測定熒光強(qiáng)度,即在黑背景下檢測,因此可以通過增加入射光強(qiáng)度來提高靈敏度,而紫外可見測定參數(shù)是A,該值與入射光強(qiáng)度和透射光比值有關(guān),入射光增大,透射光也增大,增大檢測器的放大倍數(shù),也影響入射光和透射光的檢測,因此限制了靈敏度
因?yàn)椤と肷涔鈴?qiáng)的原因 在紫外-可見分光光度法中入射光強(qiáng) 吸收光強(qiáng)就增加 而熒光分析法中入射光強(qiáng)增加 不會(huì)影響吸收光強(qiáng) 所以A增加 靈敏度提高 第二是儀器結(jié)構(gòu)不同紫外-可見分光光度法中是平行的 而熒光分析法是垂直的
據(jù)說是,紫外是由于電子從基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài),是從穩(wěn)態(tài)到不穩(wěn)態(tài),所以比較困難,靈敏度低;而熒光則是由激發(fā)態(tài)返回基態(tài),從不穩(wěn)態(tài)到穩(wěn)態(tài),大勢所趨呀,所以容易測,即靈敏度高。按理說同一物質(zhì)其紫外吸收波長和熒光發(fā)射波長應(yīng)該是一致的,如果儀器好的話。 又,在另一本書上說,與紫外比,熒光是從與入射光垂直方向檢測,即在黑背景下檢測熒光的發(fā)射,所以一般熒光分析的靈敏度比紫外高2~4個(gè)數(shù)量級。

5,熒光分光光度法測物質(zhì)的含量時(shí)為什么要選擇最大激發(fā)波長和最大熒光

熒光析熒光析 附錄Ⅳ E. 熒光析 某些物質(zhì)受紫外光或見光照射激發(fā)能發(fā)射比激發(fā)光波較熒光物質(zhì)激發(fā)光譜熒光發(fā)射光譜用作該物質(zhì)定性析激發(fā)光強(qiáng)度、波、所用溶劑及溫度等條件固定物質(zhì)定濃度范圍內(nèi)其發(fā)射光強(qiáng)度與溶液該物質(zhì)濃度比關(guān)系用作定量析熒光析靈敏度般較紫外光光度或比色高濃度太溶液自熄滅作用及由于液面附近溶液吸收激發(fā)光使發(fā)射光強(qiáng)度降導(dǎo)致發(fā)射光強(qiáng)度與濃度比故熒光析應(yīng)低濃度溶液進(jìn)行 所用儀器熒光計(jì)或熒光光光度計(jì)按各藥品項(xiàng)規(guī)定選定激發(fā)光波發(fā)射光波并配制照品溶液供試品溶液 由于易測定絕熒光強(qiáng)度故熒光析都定條件用照品溶液測定熒光強(qiáng)度與濃度線性范圍再每測定前用定濃度照品溶液校定儀器靈敏度;相同條件別讀取照品溶液及其試劑空白熒光讀數(shù)與供試品溶液及其試劑空白熒光讀數(shù)用式計(jì)算供試品濃度: R-R C=×C R-R 式 C供試品溶液濃度; C照品溶液濃度; R供試品溶液熒光讀數(shù); R供試品溶液試劑空白熒光讀數(shù); R照品溶液熒光讀數(shù); R照品溶液試劑空白熒光讀數(shù) 熒光析濃度與讀數(shù)線性較窄故(R-R)/(R-R<[rb]>)應(yīng)0.50~2.0;超應(yīng)調(diào)節(jié)溶液濃度再測 易光解品種使儀器靈敏度定標(biāo)準(zhǔn)確避免激發(fā)光照射影響熒光強(qiáng)度選擇種激發(fā)光發(fā)射光波與近似光穩(wěn)定物質(zhì)配適濃度溶液作基準(zhǔn)溶液例藍(lán)色熒光用硫酸奎寧稀硫酸溶液黃綠色熒光用熒光素鈉水溶液紅色熒光用羅丹明B水溶液等,測定供試品溶液用基準(zhǔn)溶液代替照品溶液校定儀器靈敏度 熒光析靈敏度高故干擾素溶劑純帶入較誤差應(yīng)先作空白檢查必要應(yīng)用玻璃磨口蒸餾器蒸餾再用溶液懸浮物光散射作用必要應(yīng)用垂熔玻璃濾器濾或用離除所用玻璃儀器與測定池等必須保持高度潔凈溫度熒光強(qiáng)度較影響測定應(yīng)控制溫度致溶液溶氧降低熒光作用必要測定前通入惰性氣體除氧感覺這樣的提問沒有意義感覺這樣的提問沒有什么意義哈
比較最大激發(fā)波長和最大發(fā)射熒光波長的熒光強(qiáng)度意義不大。這是因?yàn)闄z測到的激發(fā)峰和發(fā)射峰只是從樣品發(fā)出來的光的一小部分,并且檢測到激發(fā)峰的原因是由于激發(fā)光在經(jīng)過樣品和空氣時(shí)發(fā)生、折射、散射等因素才進(jìn)入發(fā)射單色器被檢測器檢測到。 一般來說,比較熒光最大激發(fā)波長和熒光最大發(fā)射波長處熒光的強(qiáng)度從一些應(yīng)用上可以說明該熒光物質(zhì)的熒光效率,也就是這種熒光物質(zhì)在最佳激發(fā)波長條件下可以發(fā)出熒光光子的多少。

6,時(shí)間分辨熒光

時(shí)間分辨熒光分析法(TRFIA)實(shí)際上是在熒光分析(FIA)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的,它是一種特殊的熒光分析。熒光分析的利用了熒光的波長與其激發(fā)波長的巨大差異克服了普通紫外-可見分光分析法中雜色光的影響,同時(shí),熒光分析與普通分光不同,光電接受器與激發(fā)光不在同一直線上,激發(fā)光不能直接到達(dá)光電接受器,從而大幅度的提高了光學(xué)分析的靈敏度。但是,當(dāng)進(jìn)行超微量分析的時(shí)候,激發(fā)光的雜散光的影響就顯得嚴(yán)重了。因此,解決激發(fā)光的雜散光的影響成了提高靈敏度的瓶頸?! 〗鉀Q雜散光影響的最好方法當(dāng)然是測量時(shí)沒有激發(fā)光的存在。但普通的熒光標(biāo)志物熒光壽命非常短,激發(fā)光消失,熒光也消失。不過有非常少的稀土金屬(Eu、Tb、Sm、Dy)的熒光壽命較長,可達(dá)1-2ms,能夠滿足測量要求,因此而產(chǎn)生了時(shí)間分辨熒光分析法,即使用長效熒光標(biāo)記物,在關(guān)閉激發(fā)光后再測定熒光強(qiáng)度的分析方法?! ∑綍r(shí)常用的稀土金屬主要是Eu(銪)和Tb(鋱),Eu熒光壽命1ms,在水中不穩(wěn)定,但加入增強(qiáng)劑后可以克服;Tb熒光壽命1.6ms,水中穩(wěn)定,但其熒光波長短、散射嚴(yán)重、能量大易使組分分解,因此從測量方法學(xué)上看Tb很好,但不適合用于生物分析,故Eu最為常用。  由于常用Eu作為熒光標(biāo)記,因此增強(qiáng)劑就成了試劑中的重要組成。增強(qiáng)劑原理:利用含絡(luò)合劑、表面活性劑的溶液的親水和親脂性同時(shí)存在,使Eu在水中處于穩(wěn)定狀態(tài)?,F(xiàn)在有些試劑,在絡(luò)合Eu在抗體上時(shí)已考慮了增強(qiáng)問題,而使用了具有增強(qiáng)作用的新絡(luò)合劑,因而有的試劑沒有單獨(dú)的增強(qiáng)劑?! ‰S著檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的發(fā)展,對微量、超微量的測定會(huì)越來越多,同時(shí)RIA的污染問題會(huì)越來越被重視,因此,時(shí)間分辨熒光分析法(TRFIA)具有越來越大的應(yīng)用空間。
時(shí)間分辨熒光分析法(time resolved fluoroisnmunoassay,trfia)是近十年發(fā)展起來的一測微量分析方法,是目前最靈敏的微量分析技術(shù),其靈敏度高達(dá)10-19,較放射免疫分析(ria)高出3個(gè)數(shù)量級。   時(shí)間分辨熒光分析法(trfia)實(shí)際上是在熒光分析(fia)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的,它是一種特殊的熒光分析。熒光分析的利用了熒光的波長與其激發(fā)波長的巨大差異克服了普通紫外-可見分光分析法中雜色光的影響,同時(shí),熒光分析與普通分光不同,光電接受器與激發(fā)光不在同一直線上,激發(fā)光不能直接到達(dá)光電接受器,從而大幅度的提高了光學(xué)分析的靈敏度。但是,當(dāng)進(jìn)行超微量分析的時(shí)候,激發(fā)光的雜散光的影響就顯得嚴(yán)重了。因此,解決激發(fā)光的雜散光的影響成了提高靈敏度的瓶頸。   解決雜散光影響的最好方法當(dāng)然是測量時(shí)沒有激發(fā)光的存在。但普通的熒光標(biāo)志物熒光壽命非常短,激發(fā)光消失,熒光也消失。不過有非常少的稀土金屬(eu、tb、sm、dy)的熒光壽命較長,可達(dá)1-2ms,能夠滿足測量要求,因此而產(chǎn)生了時(shí)間分辨熒光分析法,即使用長效熒光標(biāo)記物,在關(guān)閉激發(fā)光后再測定熒光強(qiáng)度的分析方法。   平時(shí)常用的稀土金屬主要是eu(銪)和tb(鋱),eu熒光壽命1ms,在水中不穩(wěn)定,但加入增強(qiáng)劑后可以克服;tb熒光壽命1.6ms,水中穩(wěn)定,但其熒光波長短、散射嚴(yán)重、能量大易使組分分解,因此從測量方法學(xué)上看tb很好,但不適合用于生物分析,故eu最為常用。   由于常用eu作為熒光標(biāo)記,因此增強(qiáng)劑就成了試劑中的重要組成。增強(qiáng)劑原理:利用含絡(luò)合劑、表面活性劑的溶液的親水和親脂性同時(shí)存在,使eu在水中處于穩(wěn)定狀態(tài)。現(xiàn)在有些試劑,在絡(luò)合eu在抗體上時(shí)已考慮了增強(qiáng)問題,而使用了具有增強(qiáng)作用的新絡(luò)合劑,因而有的試劑沒有單獨(dú)的增強(qiáng)劑。   隨著檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的發(fā)展,對微量、超微量的測定會(huì)越來越多,同時(shí)ria的污染問題會(huì)越來越被重視,因此,時(shí)間分辨熒光分析法(trfia)具有越來越大的應(yīng)用空間。
文章TAG:熒光熒光分析分析時(shí)間熒光分析

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