熒光顯微鏡光源，一般熒光顯微鏡要配那種燈泡比較好

來源：整理時(shí)間：2024-12-10 22:40:31 編輯：智能門戶手機(jī)版

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1，一般熒光顯微鏡要配那種燈泡比較好
2，如何選購(gòu)熒光顯微鏡的光源
3，熒光顯微鏡為什么要以汞燈當(dāng)電源
4，熒光顯微鏡的作用原理
5，普通光學(xué)顯微鏡和熒光顯微鏡的區(qū)別
6，熒光顯微鏡的工作原理

1，一般熒光顯微鏡要配那種燈泡比較好

熒光顯微鏡用的主要是高壓球形汞燈，也有一些是用 LED 燈的，LED燈的，主要是用在BG激發(fā)光上，如果你用以紫外光，建議還是選擇汞燈的，有需要的話可以和上海測(cè)維光電技術(shù)有限公司聯(lián)系！

一般熒光顯微鏡要配那種燈泡比較好

2，如何選購(gòu)熒光顯微鏡的光源

熒光顯微鏡是用來看熒光標(biāo)本的，它的波長(zhǎng)短，普通顯微鏡是用普通可見光源看標(biāo)本的。原理:熒光鏡檢術(shù)是用短波長(zhǎng)的光線照射用熒光素染色過的被檢物體，使之受激發(fā)后而產(chǎn)生長(zhǎng)波長(zhǎng)的熒光，然后觀察。優(yōu)點(diǎn)： ? 檢出能力高（放大作用） ? 對(duì)細(xì)胞的刺激小（可以活體染色） ? 能進(jìn)行多重染色用途： ? 物體構(gòu)造的觀察——熒光素 ? 熒光的有無、色調(diào)比較進(jìn)行物質(zhì)判別——抗體熒光等 ? 發(fā)熒光量的測(cè)定對(duì)物質(zhì)定性、定量分析

如何選購(gòu)熒光顯微鏡的光源

3，熒光顯微鏡為什么要以汞燈當(dāng)電源

因?yàn)橛?guó)顯微鏡需要有豐富的紫外線來激發(fā)標(biāo)本的熒光汞燈發(fā)射的光譜里含有豐富的紫外光，自然適合用來作為熒光顯微鏡光源

熒光顯微鏡汞燈好貴呀,好幾千塊錢一個(gè),才能用200 小時(shí)。使用的時(shí)候合理安排使用時(shí)間，盡量減少開關(guān)次數(shù)。不要頻繁開關(guān)，打開后半小時(shí)內(nèi)不要關(guān)，關(guān)閉后半小時(shí)內(nèi)不要開。不過聽說廣州明美的熒光顯微鏡的汞燈質(zhì)量滿好的，而且價(jià)格也比較優(yōu)惠，還有專業(yè)的人士全程為了解答。

熒光顯微鏡為什么要以汞燈當(dāng)電源

4，熒光顯微鏡的作用原理

熒光的原理是某些物質(zhì)會(huì)在高強(qiáng)度的短波長(zhǎng)光線照射下，會(huì)發(fā)出波長(zhǎng)稍長(zhǎng)的發(fā)射光（熒光）。而我們一般都是觀察被激發(fā)熒光基團(tuán)所發(fā)射出來的波長(zhǎng)稍長(zhǎng)的發(fā)射光（熒光）。但是激發(fā)的光會(huì)很強(qiáng)，所以我們就需要把激發(fā)的光全部濾去，這樣才可以看到熒光基團(tuán)的發(fā)射光（熒光）。熒光顯微鏡一般都用高強(qiáng)度的汞燈做激發(fā)光源。使用濾色片把不需要的光濾去，只留下激發(fā)熒光集團(tuán)的高強(qiáng)度很純的光線。這個(gè)單色的光線通過物鏡照射到樣本上之后，樣本會(huì)被激發(fā)出發(fā)射光（熒光），熒光和激發(fā)光都會(huì)沿著物鏡光路返回，這樣的話，就需要用一個(gè)二相色鏡把激發(fā)光濾去，只讓我們需要看到的熒光透過。這個(gè)熒光沿著顯微鏡的光路最后到達(dá)目鏡下，然后進(jìn)入我們的眼睛，我們就可以看到熒光基團(tuán)所發(fā)出來的熒光了。注：在熒光顯微鏡中，最核心的是 1 熒光光源，因?yàn)闊晒庑枰邚?qiáng)度的光才可以被激發(fā)出來，我們一般都用汞燈，另外還有長(zhǎng)壽命金屬鹵素?zé)?，?dāng)然還有激光。2 激發(fā)塊（幾個(gè)濾色塊組成的組件，一般有激發(fā)光濾色片、二相色鏡、發(fā)射光濾色片），因?yàn)槲覀兊臒晒饣鶊F(tuán)都是在特定波長(zhǎng)的光線下才可以激發(fā)，并且被激發(fā)的發(fā)射光也具有特定波長(zhǎng)。所以需要選擇合適的激發(fā)塊（主要是選擇激發(fā)光濾色片、二相色鏡、發(fā)射光濾色片這三個(gè)的可以通過的光線波長(zhǎng)等參數(shù)）。另外物鏡也對(duì)熒光顯微鏡有很大影響。因?yàn)橹挥懈邫n次的物鏡才可以提供完好的色差矯正。

5，普通光學(xué)顯微鏡和熒光顯微鏡的區(qū)別

光學(xué)顯微鏡：是利用光學(xué)原理，把人眼所不能分辨的微小物體放大成像，以供人們提取微細(xì)結(jié)構(gòu)信息的光學(xué)儀器。熒光顯微鏡 : 熒光顯微鏡是以紫外線為光源，用以照射被檢物體，使之發(fā)出熒光，然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。熒光顯微鏡用于研究細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的吸收、運(yùn)輸、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等。細(xì)胞中有些物質(zhì)，如葉綠素等，受紫外線照射后可發(fā)熒光;另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光，但如果用熒光染料或熒光抗體染色后，經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光，熒光顯微鏡就是對(duì)這類物質(zhì)進(jìn)行定性和定量研究的工具之一。光學(xué)顯微鏡一般由載物臺(tái)、聚光照明系統(tǒng)、物鏡，目鏡和調(diào)焦機(jī)構(gòu)組成。聚光照明系統(tǒng)通過改變照明方式，可以獲得亮背景上的暗物點(diǎn)(稱亮視場(chǎng)照明)或暗背景上的亮物點(diǎn)(稱暗視場(chǎng)照明)等不同的觀察方式，以便在不同情況下更好地發(fā)現(xiàn)和觀察微細(xì)結(jié)構(gòu)。熒光顯微鏡和普通顯微鏡有以下的區(qū)別:1.照明方式通常為落射式，即光源通過物鏡投射于樣品上;2.光源為紫外光，波長(zhǎng)較短，分辨力高于普通顯微鏡;3.有兩個(gè)特殊的濾光片，光源前的用以濾除可見光，目鏡和物鏡之間的用于濾除紫外線，用以保護(hù)人眼。熒光顯微鏡也是光學(xué)顯微鏡的一種，主要的區(qū)別是二者的激發(fā)波長(zhǎng)不同。由此決定了熒光顯微鏡與普通光學(xué)顯微鏡結(jié)構(gòu)和使用方法上的不同。熒光顯微鏡是免疫熒光細(xì)胞化學(xué)的基本工具。它是由光源、濾板系統(tǒng)和光學(xué)系統(tǒng)等主要部件組成。是利用一定波長(zhǎng)的光激發(fā)標(biāo)本發(fā)射熒光，通過物鏡和目鏡系統(tǒng)放大以觀察標(biāo)本的熒光圖像。

熒光顯微鏡和普通顯微鏡有以下的區(qū)別：1.照明方式通常為落射式，即光源通過物鏡投射于樣品上； 2.光源為紫外光，波長(zhǎng)較短，分辨力高于普通顯微鏡； 3.有兩個(gè)特殊的濾光片，光源前的用以濾除可見光，目鏡和物鏡之間的用于濾除紫外線，用以保護(hù)人目。熒光顯微鏡也是光學(xué)顯微鏡的一種，主要的區(qū)別是二者的激發(fā)波長(zhǎng)不同。由此決定了熒光顯微鏡與普通光學(xué)顯微鏡結(jié)構(gòu)和使用方法上的不同。　　熒光顯微鏡是免疫熒光細(xì)胞化學(xué)的基本工具。它是由光源、濾板系統(tǒng)和光學(xué)系統(tǒng)等主要部件組成。是利用一定波長(zhǎng)的光激發(fā)標(biāo)本發(fā)射熒光，通過物鏡和目鏡系統(tǒng)放大以觀察標(biāo)本的熒光圖像。

主要區(qū)別在于第一點(diǎn)熒光顯微鏡.照明方式通常為落射式，即光源通過物鏡投射于樣品上；第二點(diǎn)光源為紫外光，波長(zhǎng)較短，分辨力高于普通顯微鏡；第三點(diǎn)有兩個(gè)特殊的濾光片，光源前的用以濾除可見光，目鏡和物鏡之間的用于濾除紫外線，用以保護(hù)人眼。

熒光顯微鏡是光學(xué)顯微鏡中的一種熒光顯微鏡是以紫外線為光源, 用以照射被檢物體, 使之發(fā)出熒光, 然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。熒光顯微鏡用于研究細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的吸收、運(yùn)輸、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等。細(xì)胞中有些物質(zhì),如葉綠素等,受紫外線照射后可發(fā)熒光;另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光,但如果用熒光染料或熒光抗體染色后,經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光,熒光顯微鏡就是對(duì)這類物質(zhì)進(jìn)行定性和定量研究的工具之一。熒光顯微鏡和普通顯微鏡有以下的區(qū)別: 1.照明方式通常為落射式,即光源通過物鏡投射于樣品上; 2.光源為紫外光,波長(zhǎng)較短,分辨力高于普通顯微鏡; 3.有兩個(gè)特殊的濾光片,光源前的用以濾除可見光,目鏡和物鏡之間的用于濾除紫外線,用以保護(hù)人目。熒光顯微鏡也是光學(xué)顯微鏡的一種,主要的區(qū)別是二者的激發(fā)波長(zhǎng)不同。由此決定了熒光顯微鏡與普通光學(xué)顯微鏡結(jié)構(gòu)和使用方法上的不同。熒光顯微鏡是免疫熒光細(xì)胞化學(xué)的基本工具。它是由光源、濾板系統(tǒng)和光學(xué)系統(tǒng)等主要部件組成。是利用一定波長(zhǎng)的光激發(fā)標(biāo)本發(fā)射熒光,通過物鏡和目鏡系統(tǒng)放大以觀察標(biāo)本的熒光圖像。

6，熒光顯微鏡的工作原理

多采用200W的超高壓汞燈作光源，它是用石英玻璃制作，中間呈球形，內(nèi)充一定數(shù)量的汞，工作時(shí)由兩個(gè)電極間放電，引起水銀蒸發(fā)，球內(nèi)氣壓迅速升高，當(dāng)水銀完全蒸發(fā)時(shí)，可達(dá)50～70個(gè)標(biāo)準(zhǔn)大氣壓力，這一過程一般約需5～15min。超高壓汞燈的發(fā)光是電極間放電使水銀分子不斷解離和還原過程中發(fā)射光量子的結(jié)果。它發(fā)射很強(qiáng)的紫外和藍(lán)紫光，足以激發(fā)各類熒光物質(zhì)，因此，為熒光顯微鏡普遍采用。超高壓汞燈也散發(fā)大量熱能。因此，燈室必須有良好的散熱條件，工作環(huán)境溫度不宜太高。新型超高壓汞燈在使用初期不需高電壓即可引燃，使用一些時(shí)間后，則需要高壓?jiǎn)?dòng)（約為15000V），啟動(dòng)后，維持工作電壓一般為50～60V，工作電流約4A左右。200W超高壓汞燈的平均壽命，在每次使用2h的情況下約為200h，開動(dòng)一次工作時(shí)間愈短，則壽命愈短，如開一次只工作20min，則壽命降低50%。因此，使用時(shí)盡量減少啟動(dòng)次數(shù)。燈泡在使用過程中，其光效是逐漸降低的。燈熄滅后要等待冷卻才能重新啟動(dòng)。點(diǎn)燃燈泡后不可立即關(guān)閉，以免水銀蒸發(fā)不完全而損壞電極，一般需要等15min。由于超高壓汞燈壓力很高，紫外線強(qiáng)烈，因此燈泡必須置燈室中方可點(diǎn)燃，以免傷害眼睛和發(fā)生爆炸時(shí)造成操作。超高壓汞燈（100W或200W）光源的電路和包括變壓、鎮(zhèn)流、啟動(dòng)幾個(gè)部分。在燈室上有調(diào)節(jié)燈泡發(fā)光中心的系統(tǒng)，燈泡球部后面安裝有鍍鋁的凹面反射鏡，前面安裝有集光透鏡。國(guó)產(chǎn)超高壓汞燈GCQ-200型性能良好，可以代替HBO-200等型的進(jìn)口燈泡，平均壽命在200h以上，價(jià)格也比較低。我國(guó)研制的一種簡(jiǎn)易輕便型高色溫溴鎢熒光光源裝置，體積小，重量輕，功率小，交、直流兩用（自帶直流電源），易于攜帶，使用方便，已推廣應(yīng)用。濾色系統(tǒng)是熒光顯微鏡的重要部位，由激發(fā)濾板和壓制濾板組成。濾板型號(hào)，各廠家名稱常不統(tǒng)一。濾板一般都以基本色調(diào)命名，前面字母代表色調(diào)，后面字母代表玻璃，數(shù)字代表型號(hào)特點(diǎn)。如德國(guó)產(chǎn)品（Schott）BG12，就是種藍(lán)色玻璃，B是藍(lán)色的第一個(gè)字母，G是玻璃的第一個(gè)字母；我國(guó)產(chǎn)品的名稱已統(tǒng)一用拼音字母表示，如相當(dāng)于BG12的藍(lán)色濾板名為QB24，Q是青色（藍(lán)色）拼音的第一個(gè)字母，B是玻璃拼音的第一個(gè)字母。不過有的濾板也可以透光分界濾長(zhǎng)命名，如K530，就是表示壓制濾長(zhǎng)530nm以下的光而透過530nm以上的光。還有的廠家的濾板完全以數(shù)字命名，如美國(guó)Corning廠的NO：5-58，即相當(dāng)于BG12。1．激發(fā)濾板根據(jù)光源和熒光色素的特點(diǎn)，可選用以下三類激發(fā)濾板，提供一定波長(zhǎng)范圍的激發(fā)光。紫外光激發(fā)濾板：此濾板可使400nm以下的紫外光透過，阻擋400nm以上的可見光通過。常用型號(hào)為UG-1或UG-5，外加一塊BG-38，以除去紅色尾波。紫外藍(lán)光激發(fā)濾板：此濾板可使300～450nm范圍內(nèi)的光通過。常用型號(hào)為ZB-2或ZB-3，外加BG-38。紫藍(lán)光激發(fā)濾板：它可使350～490nm的光通過。常用型號(hào)為QB24（BG12）。最大吸收峰在500nm以上者的熒光素（如羅達(dá)明色素）可用藍(lán)綠濾板（如B-7）激發(fā)。開始采用金屬膜干涉濾板，由于針對(duì)性強(qiáng)，波長(zhǎng)適當(dāng)，因而激發(fā)效果比較玻璃濾更好。如西德Leitz廠的FITC專用KP490濾板和羅達(dá)明的S546綠色濾板，均遠(yuǎn)比玻璃濾板效果好。激發(fā)濾板分薄厚兩種，一般暗視野選用薄濾板，亮視野熒光顯微鏡可選用厚一些?；疽笫且垣@得最明亮的熒光和最好的背景為準(zhǔn)。2．壓制濾板壓制濾板的作用是完全阻擋激發(fā)光通過，提供相應(yīng)波長(zhǎng)范圍的熒光。與激發(fā)濾板相對(duì)應(yīng)，常用以下3種壓制濾板：紫外光壓制濾板：可通過可見光、阻擋紫外光通過。能與UG-1或UG-5組合。常用GG-3K430或GG-6K460。紫藍(lán)光壓制濾板：能通過510nm以上波長(zhǎng)的光（綠到紅），能與BG-12組合。通常用OG-4K510或OG-1K530。紫外紫光壓制濾板：能通過460nm以上波長(zhǎng)的光（藍(lán)到紅），可與BG-3組合，常用OG-11K470AK 490，K510。專為熒光顯微鏡設(shè)計(jì)制作的聚光器是用石英玻璃或其他透紫外光的玻璃制成。分明視野聚光器的暗視野聚光器兩種。還有相差熒光聚光器。1．明視野聚光器在一般熒光顯微鏡上多用明視野聚光器，它具有聚光力強(qiáng)，使用方便，特別適于低、中倍放大的標(biāo)本觀察。2．暗視野聚光器暗視野聚光器在熒光顯微鏡中的應(yīng)用日益廣泛。因?yàn)榧ぐl(fā)光不直接進(jìn)入物鏡，因而除散射光外，激發(fā)光也不進(jìn)入目鏡，可以使用薄的激發(fā)濾板，增強(qiáng)激發(fā)光的強(qiáng)度，壓制濾板也可以很薄，因紫外光激發(fā)時(shí)，可用無色濾板（不透過紫外）而仍然產(chǎn)生黑暗的背景。從而增強(qiáng)了熒光圖像的亮度和反襯度，提高了圖像的質(zhì)量，觀察舒適，可能發(fā)現(xiàn)亮視野難以分辨的細(xì)微熒光顆粒。3．相差熒光聚光器相差聚光器與相差物鏡配合使用，可同時(shí)進(jìn)行相差和熒光聯(lián)合觀察，既能看到熒光圖像，又能看到相差圖像，有助于熒光的定位準(zhǔn)確。一般熒光觀察很少需要這種聚光器。熒光顯微鏡CCD一般具有良好的弱光捕捉能力，能夠捕捉到極其微弱的熒光，因此成像能力好，此外，很多熒光冷CCD生產(chǎn)上搜對(duì)此類CCD作了制冷處理，使得此類CCD的噪音大大降低，信噪比得以很大的提高。由于其方便應(yīng)用效果，此類CCD相機(jī)被廣泛應(yīng)用于熒光顯微鏡。