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elisa實(shí)驗(yàn)原理,ELISA法顯色原理是啥

來源:整理 時(shí)間:2023-08-26 19:42:47 編輯:智能門戶 手機(jī)版

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1,ELISA法顯色原理是啥

正相反。一般酶和抗體是化學(xué)鍵連接的。陽性對(duì)照中,抗體和抗原結(jié)合導(dǎo)致抗體的固定化(也就是說結(jié)合到板子上了),與抗體連接的酶就一并固定化了,所以再往酶標(biāo)板中加入底物,酶就發(fā)揮作用顯色了。陰性對(duì)照中,抗原沒有,所以抗體不能固定化,隨之沒有酶的固定化,所以加入底物不顯色。

ELISA法顯色原理是啥

2,簡(jiǎn)述ELISA的方法學(xué)及臨床應(yīng)用

ELISA基本原理是抗原或抗體預(yù)先結(jié)合到某種固相載體表面;測(cè)定時(shí),將待測(cè)樣品(含待測(cè)抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原或抗體按一定程序與結(jié)合在固相載體上的抗原或抗體反應(yīng)形成抗原抗體復(fù)合物;反應(yīng)終止時(shí),固相載體上酶標(biāo)抗原或抗體被結(jié)合量(免疫復(fù)合物)與待測(cè)標(biāo)本中待檢抗體或抗原的量呈一定比例;經(jīng)洗滌去除反應(yīng)液中其他物質(zhì),加入底物進(jìn)行顯色,最后通過定性或定量分析有色產(chǎn)物量即可確定樣品中待測(cè)物質(zhì)含量。臨床應(yīng)用:①雙抗體夾心法:用于檢測(cè)抗原,適用于檢測(cè)兩個(gè)或兩個(gè)以上抗原決定簇的多價(jià)抗原;②間接法:用于檢測(cè)抗體;③競(jìng)爭(zhēng)法:用于小分子抗原和半抗原的測(cè)定,也可以抗體進(jìn)行測(cè)定;④捕獲法:用于血清中某種抗體亞型成分(如IgM)的測(cè)定。

簡(jiǎn)述ELISA的方法學(xué)及臨床應(yīng)用

3,ELISA的簡(jiǎn)單原理不要復(fù)制粘貼那些大段大段的我看不懂最好用

最最最最最最根本原理就是一句話,抗原和抗體間的特異性結(jié)合,所有各種不同類型elisa實(shí)驗(yàn)方法都是植根于這原理上面建立起來的
你好!其基本原理就是抗原和抗體的特異性結(jié)合反應(yīng),在抗體上標(biāo)記相應(yīng)的酶等物質(zhì),然后用該酶的底物去顯色,至于在何種抗體上標(biāo)記,標(biāo)記什么就看你實(shí)驗(yàn)方法的選擇了僅代表個(gè)人觀點(diǎn),不喜勿噴,謝謝。
ELISA酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定就是使抗原包在固體上,待測(cè)的樣品(含有抗體)通過固體,其中抗體和抗原結(jié)合,再用標(biāo)記酶和這個(gè)復(fù)合物結(jié)合,形成抗原-抗體-標(biāo)記酶復(fù)合物,再加入酶的作用底物,產(chǎn)生有色產(chǎn)物,放到分光儀里測(cè)吸光度值就能判斷樣品中抗體的含量。簡(jiǎn)而言之,就是通過免疫反應(yīng),加入酶,酶的反應(yīng)底物,根據(jù)吸光度值來判斷抗原或抗體的含量。

ELISA的簡(jiǎn)單原理不要復(fù)制粘貼那些大段大段的我看不懂最好用

4,elisa的基本原理

ELISA的原理:ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。進(jìn)行檢測(cè)時(shí),樣品中的受檢物質(zhì)(抗原或抗體)與固定的抗體或抗原結(jié)合。通過洗板除去非結(jié)合物,再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,此時(shí),能固定下來的酶量與樣品中被檢物質(zhì)的量相關(guān)。通過加入與酶反應(yīng)的底物后顯色,根據(jù)顏色的深淺可以判斷樣品中物質(zhì)的含量,進(jìn)行定性或定量的分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測(cè)定方法達(dá)到很高的靈敏度。1971年Engvall和Perlmann發(fā)表了酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(enzymelinkedimmunosorbentassay, ELISA)用于IgG定量測(cè)定的文章,使得1966年用于抗原定位的酶標(biāo)抗體技術(shù)發(fā)展成液體標(biāo)本中微量物質(zhì)的測(cè)定方法。ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。這種測(cè)定方法中有3種必要的試劑:1. 固相的抗原或抗體;2. 酶標(biāo)記的抗原或抗體;3. 酶作用的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的性狀及檢測(cè)的具備條件,可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測(cè)方法。
ELISA基本原理是抗原或抗體預(yù)先結(jié)合到某種固相載體表面;測(cè)定時(shí),將待測(cè)樣品(含待測(cè)抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原或抗體按一定程序與結(jié)合在固相載體上的抗原或抗體反應(yīng)形成抗原抗體復(fù)合物;反應(yīng)終止時(shí),固相載體上酶標(biāo)抗原或抗體被結(jié)合量(免疫復(fù)合物)與待測(cè)標(biāo)本中待檢抗體或抗原的量呈一定比例;經(jīng)洗滌去除反應(yīng)液中其他物質(zhì),加入底物進(jìn)行顯色,最后通過定性或定量分析有色產(chǎn)物量即可確定樣品中待測(cè)物質(zhì)含量。
eilsa主要是基于抗原或抗體能吸附至固相載體的表面并保持其免疫活性,抗原或抗體與酶形成的酶結(jié)合物仍保持其免疫活性和酶催化活性的基本原理。在測(cè)定時(shí),把受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng),用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其它物質(zhì)分開,最后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量有一定的比例,加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺進(jìn)行定性或定量分析。
ELISA即酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn),原理:包被抗體或抗原,然后加入待檢物,里面的抗原或抗體與包被板上產(chǎn)生特異性結(jié)合,再通過酶來催化顯色反應(yīng),顯色反應(yīng)后的吸光度OD值與酶的量相關(guān),而酶的量與待檢物相關(guān),故可以檢測(cè)待檢物含量。具體方法有直接法,間接法,競(jìng)爭(zhēng)法,捕獲法,阻斷法等。
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