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共聚焦顯微鏡,激光共聚焦顯微鏡的成像原理是怎樣的

來源:整理 時間:2023-09-07 10:03:46 編輯:智能門戶 手機(jī)版

本文目錄一覽

1,激光共聚焦顯微鏡的成像原理是怎樣的

顯微鏡分為主要由目鏡和物鏡來進(jìn)行成像,它們都是凸透鏡。

激光共聚焦顯微鏡的成像原理是怎樣的

2,知道激光共聚焦顯微鏡的分辨率嗎

理論分辨率值好象沒有太多改進(jìn). 普通顯微鏡的理論分辨率是0.2微米,文獻(xiàn)說共聚焦可以做到0.18微米.
好像是這樣的,共聚焦顯微鏡主要是通過利用針孔控制焦平面的的像不受非焦平面雜光干擾來提高清晰度的,在光學(xué)上并沒有太多改善,圖象是清楚了

知道激光共聚焦顯微鏡的分辨率嗎

3,共聚焦電鏡如何使用

包括投射電鏡、掃描電鏡兩大類,現(xiàn)在新興起的高功率電鏡和元素分析電鏡都是這兩類的擴(kuò)展。掃描共聚焦顯微鏡是光學(xué)顯微鏡,不是電鏡,它是用激光作為光源,
激光共聚焦是屬于光學(xué)顯微鏡,通過激光掃描的方式工作,可以獲得三維圖像掃描電鏡是利用細(xì)聚焦電子束在樣品表面掃描時激發(fā)出來的各種物理信號來調(diào)制成像的,只能得到二維圖像,不能得到三維圖像。原子力顯微鏡根據(jù)掃描隧道顯微鏡的原理設(shè)計的高速拍攝三維圖像的顯微鏡??捎^察大分子在體內(nèi)的活動變化。

共聚焦電鏡如何使用

4,共聚焦顯微鏡的基本原理

傳統(tǒng)的光學(xué)顯微鏡使用的是場光源,標(biāo)本上每一點的圖像都會受到鄰近點的衍射或散射光的干擾;激光掃描共聚焦顯微鏡利用激光束經(jīng)照明針孔形成點光源對標(biāo)本內(nèi)焦平面的每一點掃描,標(biāo)本上的被照射點,在探測針孔處成像,由探測針孔后的光電倍增管(PMT)或冷電耦器件(cCCD)逐點或逐線接收,迅速在計算機(jī)監(jiān)視器屏幕上形成熒光圖像。照明針孔與探測針孔相對于物鏡焦平面是共軛的,焦平面上的點同時聚焦于照明針孔和發(fā)射針孔,焦平面以外的點不會在探測針孔處成像,這樣得到的共聚焦圖像是標(biāo)本的光學(xué)橫斷面,克服了普通顯微鏡圖像模糊的缺點。

5,倒置熒光顯微鏡與激光共聚焦顯微鏡有什么區(qū)別

熒光顯微鏡和激光共聚焦顯微鏡的區(qū)別激光共聚焦顯微鏡是采用激光作為光源,在傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)上采用共軛聚焦原理和裝置,并利用計算機(jī)對所觀察的對象進(jìn)行數(shù)字圖象處理的一套觀察、分析和輸出系統(tǒng)。主要系統(tǒng)包括激光光源、自動顯微鏡、掃描模塊(包括共聚焦光路通道和針孔、掃描鏡、檢測器)、數(shù)字信號處理器、計算機(jī)以及圖象輸出設(shè)備(顯示器、彩色打印機(jī))等。通過激光掃描共聚焦顯微鏡,可以對觀察樣品進(jìn)行斷層掃描和成像。因此,可以無損傷的觀察和分析細(xì)胞的三維空間結(jié)構(gòu)。同時,通過激光掃描共聚焦顯微鏡也是活細(xì)胞的動態(tài)觀察、多重免疫熒光標(biāo)記和離子熒光標(biāo)記觀察的有力工具.精確地對光譜的本質(zhì)進(jìn)行分析,區(qū)分發(fā)射光譜高度重疊的不同標(biāo)記的信號。最重要的是,對于多色的熒光染色,它能徹底消除了熒光串色的影響,同時最大限度的減少了樣品熒光信號的損失。這些都是一般光鏡所不能達(dá)到的。

6,激光共聚焦顯微鏡求助

在普通寬視野光學(xué)顯微鏡中,整個標(biāo)本全部都被水銀弧光燈或氙燈的光線照明,圖像可以用肉眼直接觀察。同時,來自焦點以外的其他區(qū)域的熒光對結(jié)構(gòu)的干擾較大,尤其是標(biāo)本的厚度在2um以上時,其影響更為明顯。激光共聚焦顯微鏡脫離了傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡的場光源和局部平面成像模式,采用激光束作光源,激光束經(jīng)照明針孔,經(jīng)由分光鏡反射至物鏡,并聚焦于樣品上,對標(biāo)本焦平面上每一點進(jìn)行掃描。組織樣品中如果有可被激發(fā)的熒光物質(zhì),受到激發(fā)后發(fā)出的熒光經(jīng)原來入射光路直接反向回到分光鏡,通過探測針孔時先聚焦,聚焦后的光被光電倍增管(PMT)探測收集,并將信號輸送到計算機(jī),處理后在計算機(jī)顯示器上顯示圖像。在這個光路中,只有在焦平面的光才能穿過探測針孔,焦平面以外區(qū)域射來的光線在探測小孔平面是離焦的,不能通過小孔。因此,非觀察點的背景呈黑色,反差增加,成像清晰。由于照明針孔與探測針孔相對于物鏡焦平面是共軛的,焦平面上的點同時聚焦于照明針孔與探測針孔,焦平面以外的點不會在探測針孔處成像,即共聚焦[7]。以激光作光源并對樣品進(jìn)行掃描,在此過程中兩次聚焦,故稱為激光掃描共聚焦顯微鏡。
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