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1，C42R細(xì)胞是什么

c1/(1+r)這個(gè)是每年的現(xiàn)金流的現(xiàn)值，r是折現(xiàn)率，或者叫股東要求的報(bào)酬率之類的，稱呼很多。

c2c12 細(xì)胞：小鼠成肌細(xì)胞系

C42R細(xì)胞是什么

2，螺絲EpZn12c2C的含義

Ep.Zn12.c2C 鐵表面鍍鋅12微米，Ep應(yīng)為：electroplate 電鍍這是新國(guó)標(biāo)13911-1992 GB/T代替1238-1976表示電鍍的D .c2c表示電鍍鋅后鉻酸鹽處理——彩紅鉻酸鹽處理 c2C 代替老國(guó)標(biāo)DC 飛凡緊固系統(tǒng)

螺絲EpZn12c2C的含義

3，健康的目的基因在肌細(xì)胞中成功表達(dá)的關(guān)鍵是什么

C2C12細(xì)胞的分化過(guò)程能很好地呈現(xiàn)成肌細(xì)胞的增殖，分化烏融合是非常理想的細(xì)胞模型，根據(jù)CAsQ1在C212分化過(guò)程中的表達(dá)譜，發(fā)現(xiàn)在分化前期(誘導(dǎo)后1到4天)，CASQ1表達(dá)量極低，隨著C2C12誘導(dǎo)成肌管數(shù)目的增多，肌纖維融合進(jìn)一步進(jìn)行，該基因的表達(dá)有顯著上調(diào)趨勢(shì)。與此相一致，CASQ1在胚胎大部分時(shí)期((胚胎77天之前)都維持在較低的表達(dá)水平，而到了第91天，表達(dá)量有一個(gè)顯著上升，吊此時(shí)一成肌細(xì)胞不再繼續(xù)分化，肌纖維數(shù)量已基本穩(wěn)定，開(kāi)始進(jìn)入肌纖維融合的重要時(shí)期，這一在肌纖維融合時(shí)期有較高表達(dá)量的觀象，也反映在C2C12分化后期的表達(dá)量上。因吊，在細(xì)胞與組織水平上均表明，該基因并不參與成肌細(xì)胞何增殖與分化，而是參與肌纖維的融合與轉(zhuǎn)化丶

健康的目的基因在肌細(xì)胞中成功表達(dá)的關(guān)鍵是什么

4，請(qǐng)大家?guī)兔纯碈2C12這樣算是分化了嗎

是C2C12（也就是成肌細(xì)胞）。因?yàn)槌杉〖?xì)胞是在成人骨骼肌組織中發(fā)現(xiàn)的在創(chuàng)傷后重建肌肉組織的前體細(xì)胞，具有很好的分化能力，C2C12成肌細(xì)胞經(jīng)常被用來(lái)作為在體外系統(tǒng)研究肌肉的發(fā)育和分化。而衛(wèi)星細(xì)胞是神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的一種，已經(jīng)高度特化了。A、細(xì)胞分化是基因的選擇表達(dá)導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生變化，細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)沒(méi)有發(fā)生改變，A錯(cuò)誤；B、細(xì)胞分裂使生物體的細(xì)胞數(shù)目增加，細(xì)胞分化形成不同的組織和器官、系統(tǒng)，細(xì)胞的凋亡對(duì)于多細(xì)胞生物體的發(fā)育、細(xì)胞的更新和病原體的清除有重要作用，因此個(gè)體發(fā)育過(guò)程中細(xì)胞的分裂、分化和凋亡對(duì)于生物體都具有積極意義，B正確；C、細(xì)胞的分裂和分化存在于個(gè)體發(fā)育的整個(gè)生命過(guò)程中，C錯(cuò)誤；D、多細(xì)胞生物體細(xì)胞的衰老與機(jī)體的衰老并不是一回事，D錯(cuò)誤．

也許是的。

5，c2c12細(xì)胞是什么細(xì)胞

其是難以轉(zhuǎn)染的原代細(xì)胞。轉(zhuǎn)染效率高，推薦QIAGEN的superfect轉(zhuǎn)染試劑。磷酸鈣共沉淀轉(zhuǎn)染。帶正電的陽(yáng)離子脂質(zhì)體則不同、沉淀反應(yīng)時(shí)間，經(jīng)過(guò)內(nèi)吞被導(dǎo)入細(xì)胞、細(xì)胞孵育時(shí)間乃至各組分加入順序和混合的方式都可能對(duì)結(jié)果產(chǎn)生影響。采用電轉(zhuǎn)，但需要昂貴的電轉(zhuǎn)儀。理論上說(shuō)電穿孔法可用于各種細(xì)胞：需要電轉(zhuǎn)儀器、活體細(xì)胞，借助內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)。此法每次轉(zhuǎn)染需要更多的細(xì)胞和DNA，因?yàn)檫^(guò)高的場(chǎng)強(qiáng)和過(guò)長(zhǎng)的電脈沖時(shí)間會(huì)不可逆地傷害細(xì)胞膜而裂解細(xì)胞：最早在1973年開(kāi)始采用，形成DNA-陽(yáng)離子脂質(zhì)體復(fù)合物，狀態(tài)很不好，對(duì)原代細(xì)胞還可以，對(duì)不同的細(xì)胞可能會(huì)干擾細(xì)胞的代謝，DNA并沒(méi)有預(yù)先包埋在脂質(zhì)體中、DNA濃度，借助脂質(zhì)膜將DNA導(dǎo)入細(xì)胞膜內(nèi)，使得DNA復(fù)合物結(jié)合在帶負(fù)電的細(xì)胞表面，此法的出現(xiàn)使得轉(zhuǎn)染效率，緩沖液非常有講究，可重復(fù)性好。此法較易得到穩(wěn)定轉(zhuǎn)染：新一代的脂質(zhì)體技術(shù)，經(jīng)內(nèi)吞進(jìn)入細(xì)胞對(duì)原代培養(yǎng)的細(xì)胞，也可能是細(xì)胞內(nèi)吞作用使得DNA復(fù)合體進(jìn)入細(xì)胞：通過(guò)短暫的高電場(chǎng)電脈沖處理細(xì)胞，但轉(zhuǎn)染原代細(xì)胞比較困難，再進(jìn)行感染，重復(fù)性不佳：非病毒載體。活化的樹(shù)狀聚合物。每種細(xì)胞電轉(zhuǎn)的條件都需要進(jìn)行多次優(yōu)化。電脈沖和場(chǎng)強(qiáng)的優(yōu)化對(duì)于成功的轉(zhuǎn)染非常重要?；罨陌被梢哉{(diào)節(jié)胞內(nèi)溶酶體pH值、轉(zhuǎn)染的穩(wěn)定性和可重復(fù)性大大提高，使DNA的傳遞更有效且細(xì)胞毒性明顯降低。病毒介導(dǎo)的感染。理論上任何細(xì)胞都可以通過(guò)電轉(zhuǎn)：該聚合物的高度樹(shù)狀分枝形成球形結(jié)構(gòu)。通過(guò)使用DMSO或甘油獲得的滲透休克，抑制降解活性，形成極小的磷酸鈣-DNA復(fù)合物沉淀黏附在細(xì)胞膜表面，沿細(xì)胞膜的電壓差異會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞膜的暫時(shí)穿孔，使DNA穩(wěn)定存在，轉(zhuǎn)染時(shí)要除掉血清，pH值。非脂質(zhì)體的脂質(zhì)、鈣離子濃度，其與DNA結(jié)合形成膠束結(jié)構(gòu)而非簡(jiǎn)單的雙層膜結(jié)構(gòu)。脂質(zhì)體法。優(yōu)點(diǎn)是轉(zhuǎn)染效率特別高，而是帶負(fù)電的DNA自動(dòng)結(jié)合到帶正電的脂質(zhì)體上：感染需要將目的基因克隆到特定的病毒體系中，從而吸附到帶負(fù)電的細(xì)胞膜表面。陽(yáng)離子脂質(zhì)體細(xì)胞毒性相對(duì)較高。DEAE-葡聚糖僅限于瞬時(shí)轉(zhuǎn)染：中性脂質(zhì)體是利用脂質(zhì)膜包裹DNA。DNA被認(rèn)為是穿過(guò)孔擴(kuò)散到細(xì)胞內(nèi)的。電穿孔法，因?yàn)榧?xì)胞的死亡率高，不同細(xì)胞條件要自己摸索，經(jīng)過(guò)包裝細(xì)胞的包裝得到改造后的病毒。脂質(zhì)體法始于1987年。氯化鈣+DNA+磷酸緩沖液按一定的比例混和。 DEAE-葡聚糖，并吸附在細(xì)胞膜上。帶正電的DEAE-葡聚糖或polybrene多聚體可以結(jié)合帶負(fù)電的DNA分子，毒性低。血清的存在能顯著提高轉(zhuǎn)染效率，且不需要另外采購(gòu)特殊試劑，借助每個(gè)球體無(wú)數(shù)活化的氨基末端凝聚在DNA上形成較為致密的結(jié)構(gòu)：這是早在1965年出現(xiàn)的轉(zhuǎn)染方法，細(xì)胞電轉(zhuǎn)后，可重復(fù)性好。沉淀顆粒的大小和質(zhì)量對(duì)于轉(zhuǎn)染的成功至關(guān)重要，不足之處，選擇比較好的轉(zhuǎn)染試劑

c2c12 細(xì)胞：小鼠成肌細(xì)胞系

6，心肌肥大的基因調(diào)控

是涉及與心肌肥大相關(guān)的MR－1基因功能，動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證明了該基因的高表達(dá)，其加劇了AngⅡ?qū)π募》蚀?、炎癥及纖維化的作用，證明MR－1的作用機(jī)制是通過(guò)對(duì)核因子NF－κB信號(hào)通路的調(diào)控，干擾MR－1的表達(dá)可以降低和削弱AngⅡ?qū)F－κB信號(hào)通路的誘導(dǎo)，說(shuō)明降低或阻斷MR－1基因的表達(dá)，有望成為治療心肌肥大相關(guān)疾病的新靶點(diǎn)?！　⌒募〖?xì)胞肥大(cardiomyocyte hypertrophy)是高血壓、心臟瓣膜病、急性心肌梗塞及先天性心臟病等臨床常見(jiàn)疾病的一種并發(fā)癥，是心肌細(xì)胞對(duì)多種病理刺激的一種適應(yīng)性反應(yīng)。目前雖然認(rèn)為心肌肥大的發(fā)病機(jī)制與細(xì)胞外的心肌肥大因子刺激、細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和核內(nèi)的某些基因活化有關(guān)，但其最本質(zhì)的特征是心肌細(xì)胞基因表達(dá)的異常。大量研究表明，肥大因子刺激30min即可誘發(fā)一系列即刻早期反應(yīng)基因，如c-fos、c-myc、c-jun、egr-1等進(jìn)行表達(dá)，其后一些心肌肥大標(biāo)志基因，如MHC、ANF、BNP等被活化，最后是一些心肌收縮蛋白基因，如MLC-2、α-actin等表達(dá)上調(diào)。近年證實(shí)，無(wú)論何種刺激信號(hào)，往往都是通過(guò)激活一系列與心肌肥大發(fā)生相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子，包括Spl、Elk-1、SRF、MEF-2、GATA-4和LIM等而誘發(fā)心肌肥大的發(fā)生。LIM蛋白是一類富含半胱氨酸且分子結(jié)構(gòu)中具有一個(gè)或多個(gè)鋅指結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)家族，該家族成員廣泛參與多種細(xì)胞的發(fā)育與分化調(diào)節(jié)及多種基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控。hhlim是新近從胎兒心臟中分離和克隆的與心臟發(fā)生相關(guān)的基因，因其編碼產(chǎn)物與LIM蛋白家族高度同源且氨基酸序列中含有典型的LIM結(jié)構(gòu)域而得名。目前發(fā)現(xiàn)，hhlim在自發(fā)性高血壓大鼠和心肌肥厚大鼠的心肌細(xì)胞中表達(dá)活性增強(qiáng)，但對(duì)其是否直接參與心肌細(xì)胞肥大的發(fā)生過(guò)程及作用機(jī)制還不清楚。本文在對(duì)hhlim基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制進(jìn)行研究的基礎(chǔ)上，從整體、細(xì)胞和分子水平上探討該基因在心肌肥大發(fā)生發(fā)展中的意義及其作用機(jī)制。　　1 hhlim表達(dá)調(diào)控機(jī)制的研究　　hhlim是用三元遞減法從人胎心cDNA文庫(kù)中篩選克隆到一個(gè)與心臟生長(zhǎng)發(fā)育有關(guān)的新基因。為了探討hhlim基因的表達(dá)調(diào)控機(jī)制，將該基因5側(cè)翼區(qū)(長(zhǎng)約2550bp)不同長(zhǎng)度的片段與熒光素酶報(bào)告基因重組后，轉(zhuǎn)染小鼠成肌細(xì)胞C2C12，確定其表達(dá)調(diào)控區(qū)域，并在此基礎(chǔ)上，觀察內(nèi)皮素-1(ET-1)和堿性成纖維細(xì)胞生成長(zhǎng)因子(bFGF)對(duì)該基因表達(dá)的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：　　1.1 在被馬血清誘導(dǎo)(分化型)或不誘導(dǎo)(未分化型)的C2C12細(xì)胞中，從hhlim基因5上游-2537bp序列依次進(jìn)行缺失的9種不同長(zhǎng)度的DNA片段均可驅(qū)動(dòng)熒光素酶表達(dá)，其中，以轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)至5上游-253bp(pF8)驅(qū)動(dòng)熒光素酶基因表達(dá)的活性最高，比-2537bp(pF1)高9.9倍，比-157bp(pF9)高2.95倍。除-2037bp(pF2)片段的活性與-157bp(pF9)相近外，其它片段均有較高的活性。兩種表型的C2C12細(xì)胞相比，除pF2和pF8之外，其它片段驅(qū)動(dòng)熒光素酶表達(dá)的活性在分化型細(xì)胞均高于未分化型細(xì)胞?！　?.2 EMSA表明，從分化型和未分化型C2C12細(xì)胞中提取的核蛋白都可與hhlim基因上游-293～+16bp片段相結(jié)合，在4％PAGE上前者出現(xiàn)兩條滯后帶，后者出現(xiàn)一條滯后帶，由此說(shuō)明，兩種表型細(xì)胞的核蛋白中均含有與-293～+16bp片段特異性結(jié)合的蛋白因子，但蛋白因子的種類和/或與順式元件的相互作用方式可能不同。　　1.3 用在分化型C2C12細(xì)胞中表達(dá)活性較高的pF5轉(zhuǎn)染C2C12細(xì)胞，在用馬血清誘導(dǎo)被轉(zhuǎn)染細(xì)胞進(jìn)行分化的同時(shí)，加入心肌細(xì)胞肥大刺激因子ET-1和bFGF，觀察兩種因素對(duì)報(bào)告基因表達(dá)的影響。結(jié)果顯示，ET-1和bFGF作用于C2C12細(xì)胞24h后，熒光素酶活性在被ET-1刺激的細(xì)胞中顯著升高(達(dá)未刺激細(xì)胞的1.6倍)，至48h，其活性仍高于對(duì)照細(xì)胞；bFGF雖然也能促進(jìn)熒光素酶表達(dá)，但熒光素酶活性升高的幅度在24h低于被ET-1刺激的細(xì)胞，在48h，略高于被ET-1刺激的活性?！　?.4 RT-PCR結(jié)果顯示，處于分化過(guò)程中的C2C12細(xì)胞被ET-1和bFGF刺激后，hhlim表達(dá)活性分別于12h和6h開(kāi)始升高，24h和48h達(dá)到高峰，在該時(shí)間點(diǎn)，其表達(dá)活性分別比對(duì)照細(xì)胞高出4.5倍和3.38倍。　　上述結(jié)果提示，轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)至5上游-253bp在該基因表達(dá)調(diào)控中起重要作用，其順式作用元件與轉(zhuǎn)錄因子相互作用具有多樣性和復(fù)雜性，該基因表達(dá)受ET-1和bFGF的調(diào)節(jié)?！　? hhlim基因表達(dá)產(chǎn)物的亞細(xì)胞定位及其在細(xì)胞肥大中的意義　　hhlim作為與心臟生長(zhǎng)發(fā)育有關(guān)的基因被克隆，并發(fā)現(xiàn)其在自發(fā)性高血壓大鼠和心肌肥厚大鼠的心肌細(xì)胞中表達(dá)活性增強(qiáng)。然而，關(guān)于hhlim是否能直接引起心肌細(xì)胞肥大及其引起心肌細(xì)胞肥大的作用機(jī)制還不明了。本部分實(shí)驗(yàn)以與心肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)相似且易于轉(zhuǎn)染外源基因的小鼠成肌細(xì)胞C2C12為強(qiáng)制性表達(dá)外源性hhlim基因的細(xì)胞，觀察hhlim基因表達(dá)產(chǎn)物的亞細(xì)胞定位及其在細(xì)胞肥大中的作用。結(jié)果如下：　　2.1 用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法將真核表達(dá)載體攜帶的外源性hhlim基因?qū)胩幱诜只^(guò)程中的C2C12細(xì)胞，證實(shí)該基因強(qiáng)制性表達(dá)可使C2C12細(xì)胞體積明顯增大?！　?.2 Western blot分析結(jié)果顯示，在未分化型C2C12細(xì)胞中檢測(cè)不到α-actin的存在，未分化型C2C12細(xì)胞被外源性hhlim轉(zhuǎn)染后，α-actin出現(xiàn)低量表達(dá)，說(shuō)明hhlim強(qiáng)制性表達(dá)可誘導(dǎo)未分化型C2C12細(xì)胞表達(dá)α-actin；在被馬血清誘導(dǎo)分化的C2C12細(xì)胞中，hhlim強(qiáng)制性表達(dá)使α-actin含量急劇增加，比未分化型細(xì)胞增加8.07倍，比未轉(zhuǎn)染hhlim的細(xì)胞升高1.71倍?！　?.3 RT-PCR結(jié)果顯示，在未分化型C2C12細(xì)胞中BNP表達(dá)活性較高，在被馬血清誘導(dǎo)分化成熟的C2C12細(xì)胞中BNP不表達(dá)，C2C12細(xì)胞被外源性hhlim轉(zhuǎn)染后再經(jīng)馬血清誘導(dǎo)時(shí)，該基因的表達(dá)又被顯著誘導(dǎo)?！　?.4 用綠色熒光蛋白-hhlim融合蛋白表達(dá)載體轉(zhuǎn)染處于分化過(guò)程的C2C12細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染不同時(shí)間，表達(dá)產(chǎn)物的亞細(xì)胞定位發(fā)生動(dòng)態(tài)變化，表現(xiàn)為先在胞核和胞質(zhì)中均有分布，而后定位于胞質(zhì)的變化規(guī)律。在ET-1誘導(dǎo)下，內(nèi)源性hhlim的亞細(xì)胞定位也發(fā)生動(dòng)態(tài)變化，表現(xiàn)為誘導(dǎo)24h時(shí)，hhlim蛋白在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核中均有分布，但主要集中分布在胞核中，誘導(dǎo)48h后，細(xì)胞核中的紅色熒光明顯減弱，胞質(zhì)熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng)?！　?.5 以hhlim抗體和蛋白A-Sepharose對(duì)C2C12細(xì)胞裂解液進(jìn)行免疫沉淀后，用抗α-actin抗體進(jìn)行Western blot分析的結(jié)果表明，在分化型細(xì)胞，hhlim抗體可以使α-actin共沉淀，即沉淀物中出現(xiàn)明顯的α-actin條帶；在轉(zhuǎn)染hhlim后的分化型細(xì)胞，條帶明顯加深；轉(zhuǎn)染hhlim的未分化型細(xì)胞中α-actin條帶很淺，在未分化型C2C12細(xì)胞中檢測(cè)不到α-actin的存在。免疫雙熒光分析結(jié)果顯示，TRITC標(biāo)記的hhlim蛋白與FITC標(biāo)記的α-actin熒光相互重合為黃色熒光。提示，hhlim在胞質(zhì)中以與α-actin相互締合的方式存在。　　上述結(jié)果提示，在C2C12細(xì)胞從未分化型向分化型轉(zhuǎn)化的早期，hhlim蛋白主要存在于核內(nèi)，此時(shí)可能發(fā)揮啟動(dòng)心肌細(xì)胞肥大相關(guān)基因表達(dá)的作用；在分化型細(xì)胞中，hhlim蛋白主要分布于胞質(zhì)中，胞質(zhì)中的hhlim可能以與α-actin相互締合的方式參與細(xì)胞骨架的構(gòu)成?！　? hhlim對(duì)心肌肥大的影響及其作用機(jī)制探討　　第二部分研究表明，hhlim具有啟動(dòng)C2C12細(xì)胞肥大相關(guān)基因表達(dá)及引發(fā)細(xì)胞肥大的作用。為進(jìn)一步研究其是否也能引起心肌細(xì)胞肥大，本部分用攜帶hhlim cDNA的真核表達(dá)載體轉(zhuǎn)染心肌細(xì)胞后，觀察其強(qiáng)制性表達(dá)對(duì)心肌肥大的影響，并通過(guò)檢測(cè)心肌細(xì)胞肥大相關(guān)基因表達(dá)的變化，探討hhlim致心肌肥大的作用機(jī)制。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：　　3.1 在原代心肌細(xì)胞中，hhlim基因表達(dá)活性較低，ET-1作用48h后，其表達(dá)被顯著誘導(dǎo)，表達(dá)活性達(dá)對(duì)照細(xì)胞的2.12倍。BNP mRNA在原代培養(yǎng)的細(xì)胞中不能被檢出，ET-1作用于細(xì)胞48h或轉(zhuǎn)染hhlim基因48h后，BNP表達(dá)活性顯著升高?！　?.2 RT-PCR結(jié)果表明，心肌細(xì)胞被可表達(dá)hhlim反義RNA的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染后，BNP的表達(dá)明顯下調(diào)，其表達(dá)活性比相應(yīng)對(duì)照細(xì)胞降低了71％。Western blot結(jié)果顯示，hhlim強(qiáng)制性表達(dá)可使心肌細(xì)胞α-actin水平比轉(zhuǎn)染空載體的細(xì)胞升高146.05％，轉(zhuǎn)染反義hhlim后，α-actin含量比相應(yīng)對(duì)照細(xì)胞下降61.97％?！　?.4 hhlim在原代心肌細(xì)胞中的強(qiáng)制性表達(dá)