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1，C42R細胞是什么

c1/(1+r)這個是每年的現(xiàn)金流的現(xiàn)值，r是折現(xiàn)率，或者叫股東要求的報酬率之類的，稱呼很多。

c2c12 細胞：小鼠成肌細胞系

C42R細胞是什么

2，螺絲EpZn12c2C的含義

Ep.Zn12.c2C 鐵表面鍍鋅12微米，Ep應為：electroplate 電鍍這是新國標13911-1992 GB/T代替1238-1976表示電鍍的D .c2c表示電鍍鋅后鉻酸鹽處理——彩紅鉻酸鹽處理 c2C 代替老國標DC 飛凡緊固系統(tǒng)

螺絲EpZn12c2C的含義

3，健康的目的基因在肌細胞中成功表達的關(guān)鍵是什么

C2C12細胞的分化過程能很好地呈現(xiàn)成肌細胞的增殖，分化烏融合是非常理想的細胞模型，根據(jù)CAsQ1在C212分化過程中的表達譜，發(fā)現(xiàn)在分化前期(誘導后1到4天)，CASQ1表達量極低，隨著C2C12誘導成肌管數(shù)目的增多，肌纖維融合進一步進行，該基因的表達有顯著上調(diào)趨勢。與此相一致，CASQ1在胚胎大部分時期((胚胎77天之前)都維持在較低的表達水平，而到了第91天，表達量有一個顯著上升，吊此時一成肌細胞不再繼續(xù)分化，肌纖維數(shù)量已基本穩(wěn)定，開始進入肌纖維融合的重要時期，這一在肌纖維融合時期有較高表達量的觀象，也反映在C2C12分化后期的表達量上。因吊，在細胞與組織水平上均表明，該基因并不參與成肌細胞何增殖與分化，而是參與肌纖維的融合與轉(zhuǎn)化丶

健康的目的基因在肌細胞中成功表達的關(guān)鍵是什么

4，請大家?guī)兔纯碈2C12這樣算是分化了嗎

是C2C12（也就是成肌細胞）。因為成肌細胞是在成人骨骼肌組織中發(fā)現(xiàn)的在創(chuàng)傷后重建肌肉組織的前體細胞，具有很好的分化能力，C2C12成肌細胞經(jīng)常被用來作為在體外系統(tǒng)研究肌肉的發(fā)育和分化。而衛(wèi)星細胞是神經(jīng)膠質(zhì)細胞的一種，已經(jīng)高度特化了。A、細胞分化是基因的選擇表達導致細胞形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生變化，細胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生改變，A錯誤；B、細胞分裂使生物體的細胞數(shù)目增加，細胞分化形成不同的組織和器官、系統(tǒng)，細胞的凋亡對于多細胞生物體的發(fā)育、細胞的更新和病原體的清除有重要作用，因此個體發(fā)育過程中細胞的分裂、分化和凋亡對于生物體都具有積極意義，B正確；C、細胞的分裂和分化存在于個體發(fā)育的整個生命過程中，C錯誤；D、多細胞生物體細胞的衰老與機體的衰老并不是一回事，D錯誤．

也許是的。

5，c2c12細胞是什么細胞

其是難以轉(zhuǎn)染的原代細胞。轉(zhuǎn)染效率高，推薦QIAGEN的superfect轉(zhuǎn)染試劑。磷酸鈣共沉淀轉(zhuǎn)染。帶正電的陽離子脂質(zhì)體則不同、沉淀反應時間，經(jīng)過內(nèi)吞被導入細胞、細胞孵育時間乃至各組分加入順序和混合的方式都可能對結(jié)果產(chǎn)生影響。采用電轉(zhuǎn)，但需要昂貴的電轉(zhuǎn)儀。理論上說電穿孔法可用于各種細胞：需要電轉(zhuǎn)儀器、活體細胞，借助內(nèi)吞作用進入細胞質(zhì)。此法每次轉(zhuǎn)染需要更多的細胞和DNA，因為過高的場強和過長的電脈沖時間會不可逆地傷害細胞膜而裂解細胞：最早在1973年開始采用，形成DNA-陽離子脂質(zhì)體復合物，狀態(tài)很不好，對原代細胞還可以，對不同的細胞可能會干擾細胞的代謝，DNA并沒有預先包埋在脂質(zhì)體中、DNA濃度，借助脂質(zhì)膜將DNA導入細胞膜內(nèi)，使得DNA復合物結(jié)合在帶負電的細胞表面，此法的出現(xiàn)使得轉(zhuǎn)染效率，緩沖液非常有講究，可重復性好。此法較易得到穩(wěn)定轉(zhuǎn)染：新一代的脂質(zhì)體技術(shù)，經(jīng)內(nèi)吞進入細胞對原代培養(yǎng)的細胞，也可能是細胞內(nèi)吞作用使得DNA復合體進入細胞：通過短暫的高電場電脈沖處理細胞，但轉(zhuǎn)染原代細胞比較困難，再進行感染，重復性不佳：非病毒載體。活化的樹狀聚合物。每種細胞電轉(zhuǎn)的條件都需要進行多次優(yōu)化。電脈沖和場強的優(yōu)化對于成功的轉(zhuǎn)染非常重要。活化的氨基可以調(diào)節(jié)胞內(nèi)溶酶體pH值、轉(zhuǎn)染的穩(wěn)定性和可重復性大大提高，使DNA的傳遞更有效且細胞毒性明顯降低。病毒介導的感染。理論上任何細胞都可以通過電轉(zhuǎn)：該聚合物的高度樹狀分枝形成球形結(jié)構(gòu)。通過使用DMSO或甘油獲得的滲透休克，抑制降解活性，形成極小的磷酸鈣-DNA復合物沉淀黏附在細胞膜表面，沿細胞膜的電壓差異會導致細胞膜的暫時穿孔，使DNA穩(wěn)定存在，轉(zhuǎn)染時要除掉血清，pH值。非脂質(zhì)體的脂質(zhì)、鈣離子濃度，其與DNA結(jié)合形成膠束結(jié)構(gòu)而非簡單的雙層膜結(jié)構(gòu)。脂質(zhì)體法。優(yōu)點是轉(zhuǎn)染效率特別高，而是帶負電的DNA自動結(jié)合到帶正電的脂質(zhì)體上：感染需要將目的基因克隆到特定的病毒體系中，從而吸附到帶負電的細胞膜表面。陽離子脂質(zhì)體細胞毒性相對較高。DEAE-葡聚糖僅限于瞬時轉(zhuǎn)染：中性脂質(zhì)體是利用脂質(zhì)膜包裹DNA。DNA被認為是穿過孔擴散到細胞內(nèi)的。電穿孔法，因為細胞的死亡率高，不同細胞條件要自己摸索，經(jīng)過包裝細胞的包裝得到改造后的病毒。脂質(zhì)體法始于1987年。氯化鈣+DNA+磷酸緩沖液按一定的比例混和。 DEAE-葡聚糖，并吸附在細胞膜上。帶正電的DEAE-葡聚糖或polybrene多聚體可以結(jié)合帶負電的DNA分子，毒性低。血清的存在能顯著提高轉(zhuǎn)染效率，且不需要另外采購特殊試劑，借助每個球體無數(shù)活化的氨基末端凝聚在DNA上形成較為致密的結(jié)構(gòu)：這是早在1965年出現(xiàn)的轉(zhuǎn)染方法，細胞電轉(zhuǎn)后，可重復性好。沉淀顆粒的大小和質(zhì)量對于轉(zhuǎn)染的成功至關(guān)重要，不足之處，選擇比較好的轉(zhuǎn)染試劑

c2c12 細胞：小鼠成肌細胞系

6，心肌肥大的基因調(diào)控

是涉及與心肌肥大相關(guān)的MR－1基因功能，動物體內(nèi)實驗證明了該基因的高表達，其加劇了AngⅡ?qū)π募》蚀?、炎癥及纖維化的作用，證明MR－1的作用機制是通過對核因子NF－κB信號通路的調(diào)控，干擾MR－1的表達可以降低和削弱AngⅡ?qū)F－κB信號通路的誘導，說明降低或阻斷MR－1基因的表達，有望成為治療心肌肥大相關(guān)疾病的新靶點。　　心肌細胞肥大(cardiomyocyte hypertrophy)是高血壓、心臟瓣膜病、急性心肌梗塞及先天性心臟病等臨床常見疾病的一種并發(fā)癥，是心肌細胞對多種病理刺激的一種適應性反應。目前雖然認為心肌肥大的發(fā)病機制與細胞外的心肌肥大因子刺激、細胞內(nèi)的信號轉(zhuǎn)導和核內(nèi)的某些基因活化有關(guān)，但其最本質(zhì)的特征是心肌細胞基因表達的異常。大量研究表明，肥大因子刺激30min即可誘發(fā)一系列即刻早期反應基因，如c-fos、c-myc、c-jun、egr-1等進行表達，其后一些心肌肥大標志基因，如MHC、ANF、BNP等被活化，最后是一些心肌收縮蛋白基因，如MLC-2、α-actin等表達上調(diào)。近年證實，無論何種刺激信號，往往都是通過激活一系列與心肌肥大發(fā)生相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子，包括Spl、Elk-1、SRF、MEF-2、GATA-4和LIM等而誘發(fā)心肌肥大的發(fā)生。LIM蛋白是一類富含半胱氨酸且分子結(jié)構(gòu)中具有一個或多個鋅指結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)家族，該家族成員廣泛參與多種細胞的發(fā)育與分化調(diào)節(jié)及多種基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控。hhlim是新近從胎兒心臟中分離和克隆的與心臟發(fā)生相關(guān)的基因，因其編碼產(chǎn)物與LIM蛋白家族高度同源且氨基酸序列中含有典型的LIM結(jié)構(gòu)域而得名。目前發(fā)現(xiàn)，hhlim在自發(fā)性高血壓大鼠和心肌肥厚大鼠的心肌細胞中表達活性增強，但對其是否直接參與心肌細胞肥大的發(fā)生過程及作用機制還不清楚。本文在對hhlim基因表達調(diào)控機制進行研究的基礎(chǔ)上，從整體、細胞和分子水平上探討該基因在心肌肥大發(fā)生發(fā)展中的意義及其作用機制。　　1 hhlim表達調(diào)控機制的研究　　hhlim是用三元遞減法從人胎心cDNA文庫中篩選克隆到一個與心臟生長發(fā)育有關(guān)的新基因。為了探討hhlim基因的表達調(diào)控機制，將該基因5側(cè)翼區(qū)(長約2550bp)不同長度的片段與熒光素酶報告基因重組后，轉(zhuǎn)染小鼠成肌細胞C2C12，確定其表達調(diào)控區(qū)域，并在此基礎(chǔ)上，觀察內(nèi)皮素-1(ET-1)和堿性成纖維細胞生成長因子(bFGF)對該基因表達的影響。實驗結(jié)果如下：　　1.1 在被馬血清誘導(分化型)或不誘導(未分化型)的C2C12細胞中，從hhlim基因5上游-2537bp序列依次進行缺失的9種不同長度的DNA片段均可驅(qū)動熒光素酶表達，其中，以轉(zhuǎn)錄起始點至5上游-253bp(pF8)驅(qū)動熒光素酶基因表達的活性最高，比-2537bp(pF1)高9.9倍，比-157bp(pF9)高2.95倍。除-2037bp(pF2)片段的活性與-157bp(pF9)相近外，其它片段均有較高的活性。兩種表型的C2C12細胞相比，除pF2和pF8之外，其它片段驅(qū)動熒光素酶表達的活性在分化型細胞均高于未分化型細胞?！　?.2 EMSA表明，從分化型和未分化型C2C12細胞中提取的核蛋白都可與hhlim基因上游-293～+16bp片段相結(jié)合，在4％PAGE上前者出現(xiàn)兩條滯后帶，后者出現(xiàn)一條滯后帶，由此說明，兩種表型細胞的核蛋白中均含有與-293～+16bp片段特異性結(jié)合的蛋白因子，但蛋白因子的種類和/或與順式元件的相互作用方式可能不同。　　1.3 用在分化型C2C12細胞中表達活性較高的pF5轉(zhuǎn)染C2C12細胞，在用馬血清誘導被轉(zhuǎn)染細胞進行分化的同時，加入心肌細胞肥大刺激因子ET-1和bFGF，觀察兩種因素對報告基因表達的影響。結(jié)果顯示，ET-1和bFGF作用于C2C12細胞24h后，熒光素酶活性在被ET-1刺激的細胞中顯著升高(達未刺激細胞的1.6倍)，至48h，其活性仍高于對照細胞；bFGF雖然也能促進熒光素酶表達，但熒光素酶活性升高的幅度在24h低于被ET-1刺激的細胞，在48h，略高于被ET-1刺激的活性。　　1.4 RT-PCR結(jié)果顯示，處于分化過程中的C2C12細胞被ET-1和bFGF刺激后，hhlim表達活性分別于12h和6h開始升高，24h和48h達到高峰，在該時間點，其表達活性分別比對照細胞高出4.5倍和3.38倍?！　∩鲜鼋Y(jié)果提示，轉(zhuǎn)錄起始點至5上游-253bp在該基因表達調(diào)控中起重要作用，其順式作用元件與轉(zhuǎn)錄因子相互作用具有多樣性和復雜性，該基因表達受ET-1和bFGF的調(diào)節(jié)。　　2 hhlim基因表達產(chǎn)物的亞細胞定位及其在細胞肥大中的意義　　hhlim作為與心臟生長發(fā)育有關(guān)的基因被克隆，并發(fā)現(xiàn)其在自發(fā)性高血壓大鼠和心肌肥厚大鼠的心肌細胞中表達活性增強。然而，關(guān)于hhlim是否能直接引起心肌細胞肥大及其引起心肌細胞肥大的作用機制還不明了。本部分實驗以與心肌細胞結(jié)構(gòu)相似且易于轉(zhuǎn)染外源基因的小鼠成肌細胞C2C12為強制性表達外源性hhlim基因的細胞，觀察hhlim基因表達產(chǎn)物的亞細胞定位及其在細胞肥大中的作用。結(jié)果如下：　　2.1 用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法將真核表達載體攜帶的外源性hhlim基因?qū)胩幱诜只^程中的C2C12細胞，證實該基因強制性表達可使C2C12細胞體積明顯增大?！　?.2 Western blot分析結(jié)果顯示，在未分化型C2C12細胞中檢測不到α-actin的存在，未分化型C2C12細胞被外源性hhlim轉(zhuǎn)染后，α-actin出現(xiàn)低量表達，說明hhlim強制性表達可誘導未分化型C2C12細胞表達α-actin；在被馬血清誘導分化的C2C12細胞中，hhlim強制性表達使α-actin含量急劇增加，比未分化型細胞增加8.07倍，比未轉(zhuǎn)染hhlim的細胞升高1.71倍?！　?.3 RT-PCR結(jié)果顯示，在未分化型C2C12細胞中BNP表達活性較高，在被馬血清誘導分化成熟的C2C12細胞中BNP不表達，C2C12細胞被外源性hhlim轉(zhuǎn)染后再經(jīng)馬血清誘導時，該基因的表達又被顯著誘導?！　?.4 用綠色熒光蛋白-hhlim融合蛋白表達載體轉(zhuǎn)染處于分化過程的C2C12細胞，發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染不同時間，表達產(chǎn)物的亞細胞定位發(fā)生動態(tài)變化，表現(xiàn)為先在胞核和胞質(zhì)中均有分布，而后定位于胞質(zhì)的變化規(guī)律。在ET-1誘導下，內(nèi)源性hhlim的亞細胞定位也發(fā)生動態(tài)變化，表現(xiàn)為誘導24h時，hhlim蛋白在細胞質(zhì)和細胞核中均有分布，但主要集中分布在胞核中，誘導48h后，細胞核中的紅色熒光明顯減弱，胞質(zhì)熒光強度顯著增強。　　2.5 以hhlim抗體和蛋白A-Sepharose對C2C12細胞裂解液進行免疫沉淀后，用抗α-actin抗體進行Western blot分析的結(jié)果表明，在分化型細胞，hhlim抗體可以使α-actin共沉淀，即沉淀物中出現(xiàn)明顯的α-actin條帶；在轉(zhuǎn)染hhlim后的分化型細胞，條帶明顯加深；轉(zhuǎn)染hhlim的未分化型細胞中α-actin條帶很淺，在未分化型C2C12細胞中檢測不到α-actin的存在。免疫雙熒光分析結(jié)果顯示，TRITC標記的hhlim蛋白與FITC標記的α-actin熒光相互重合為黃色熒光。提示，hhlim在胞質(zhì)中以與α-actin相互締合的方式存在?！　∩鲜鼋Y(jié)果提示，在C2C12細胞從未分化型向分化型轉(zhuǎn)化的早期，hhlim蛋白主要存在于核內(nèi)，此時可能發(fā)揮啟動心肌細胞肥大相關(guān)基因表達的作用；在分化型細胞中，hhlim蛋白主要分布于胞質(zhì)中，胞質(zhì)中的hhlim可能以與α-actin相互締合的方式參與細胞骨架的構(gòu)成。　　3 hhlim對心肌肥大的影響及其作用機制探討　　第二部分研究表明，hhlim具有啟動C2C12細胞肥大相關(guān)基因表達及引發(fā)細胞肥大的作用。為進一步研究其是否也能引起心肌細胞肥大，本部分用攜帶hhlim cDNA的真核表達載體轉(zhuǎn)染心肌細胞后，觀察其強制性表達對心肌肥大的影響，并通過檢測心肌細胞肥大相關(guān)基因表達的變化，探討hhlim致心肌肥大的作用機制。實驗結(jié)果如下：　　3.1 在原代心肌細胞中，hhlim基因表達活性較低，ET-1作用48h后，其表達被顯著誘導，表達活性達對照細胞的2.12倍。BNP mRNA在原代培養(yǎng)的細胞中不能被檢出，ET-1作用于細胞48h或轉(zhuǎn)染hhlim基因48h后，BNP表達活性顯著升高?！　?.2 RT-PCR結(jié)果表明，心肌細胞被可表達hhlim反義RNA的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染后，BNP的表達明顯下調(diào)，其表達活性比相應對照細胞降低了71％。Western blot結(jié)果顯示，hhlim強制性表達可使心肌細胞α-actin水平比轉(zhuǎn)染空載體的細胞升高146.05％，轉(zhuǎn)染反義hhlim后，α-actin含量比相應對照細胞下降61.97％。　　3.4 hhlim在原代心肌細胞中的強制性表達