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冷凍電鏡，小于100kd的蛋白怎么做冷凍電鏡

來(lái)源：整理時(shí)間：2024-10-08 04:47:03 編輯：智能門戶手機(jī)版

1，小于100kd的蛋白怎么做冷凍電鏡

SDS蛋白電泳能分開(kāi)不同大小的蛋白，顏色的深淺表示蛋白表達(dá)量的多少，蛋白帶粗表示蛋白產(chǎn)量多堆積在一起

我不會(huì)~~~但還是要微笑~~~：）

小于100kd的蛋白怎么做冷凍電鏡

2，能不能用冷凍組織做電鏡

不能

這個(gè)問(wèn)題要分情況討論。首先，對(duì)于傳統(tǒng)電鏡來(lái)說(shuō)，放入的樣品必須是干燥的，冷熱與否沒(méi)有具體要求，當(dāng)然也不能過(guò)熱或過(guò)冷，樣品都沒(méi)法裝入。另外，對(duì)于樣品來(lái)說(shuō)，如果冷凍干燥，不會(huì)對(duì)樣品造成影響，就可以進(jìn)行冷凍干燥

能不能用冷凍組織做電鏡

3，為什么冷凍電鏡去年突然火了是有什么技術(shù)突破嗎

冷凍電鏡，是用于掃描電鏡的超低溫冷凍制樣及傳輸技術(shù)(Cryo-SEM)，可實(shí)現(xiàn)直接觀察液體、半液體及對(duì)電子束敏感的樣品，如生物、高分子材料等。樣品經(jīng)過(guò)超低溫冷凍、斷裂、鍍膜制樣（噴金/噴碳）等處理后，通過(guò)冷凍傳輸系統(tǒng)放入電鏡內(nèi)的冷臺(tái)（溫度可至-185℃）即可進(jìn)行觀察。其中，快速冷凍技術(shù)可使水在低溫狀態(tài)下呈玻璃態(tài)，減少冰晶的產(chǎn)生，從而不影響樣品本身結(jié)構(gòu)，冷凍傳輸系統(tǒng)保證在低溫狀態(tài)下對(duì)樣品進(jìn)行電鏡觀察。過(guò)去，冷凍電鏡雖然有以上優(yōu)勢(shì)，不過(guò)高能電子束打在樣品上也會(huì)使其局部融化，影響拍攝。近期，隨著高效探測(cè)器的研發(fā)成功和在電鏡方面成功應(yīng)用，提高了拍攝效率，電子束打在樣品上，極短時(shí)間內(nèi)就完成信號(hào)收集，完成拍攝，解決了冷凍電鏡的發(fā)展瓶頸問(wèn)題

同問(wèn)。。。

為什么冷凍電鏡去年突然火了是有什么技術(shù)突破嗎

4，細(xì)胞生物學(xué)中什么叫冰凍斷裂電鏡技術(shù)分值4分

冷凍斷裂和冰凍蝕刻技術(shù) 研究細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)，特別是生物膜結(jié)構(gòu)的一種獨(dú)特的樣品制備技術(shù)。利用快速冷凍方法固定的生物組織塊具有剛性和脆性。在對(duì)其施加外力后，組織即在結(jié)構(gòu)上結(jié)合最薄弱的部位發(fā)生“脆性斷裂”，這就是“冷凍斷裂”。對(duì)于生物膜，斷裂沿膜內(nèi)部疏水區(qū)發(fā)生，從而暴露出膜內(nèi)部結(jié)構(gòu)。利用投影和復(fù)型技術(shù)，制備斷裂面的復(fù)型,然后將組織腐蝕掉,并用載網(wǎng)撈起復(fù)型膜，就可用電鏡來(lái)研究組織斷裂表面所顯示的細(xì)胞的或生物膜內(nèi)部超微結(jié)構(gòu)。在高于 10-5毫米汞柱真空度和-100℃溫度下，冷凍組織的斷裂表面上的冰升華為水蒸汽，而使原表面高度下降，即謂之“冰凍蝕刻”。由于組織各部分結(jié)構(gòu)的含水量不同，冰的升華造成各部分結(jié)構(gòu)的表面高度下降程度有差異，因此冰凍蝕刻的斷裂表面的投影、復(fù)型所顯示的斷裂表面形態(tài)具有很強(qiáng)的立體感。冷凍斷裂和冰凍蝕刻技術(shù)，為細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)，特別是關(guān)于細(xì)胞聯(lián)接、細(xì)胞融合、細(xì)胞分化以及生物膜的通透性的研究提供了許多重要信息。也為流行的生物膜結(jié)構(gòu)模型，即“流動(dòng)鑲嵌模型”的研究提供了有利的證據(jù)。

5，冷凍電子顯微鏡面臨的問(wèn)題還有解決的方法

冷凍電子顯微鏡技術(shù)不可能用于連續(xù)觀察，只能是捕捉點(diǎn)的狀態(tài)，連續(xù)的動(dòng)態(tài)觀察最有效的還是核磁共振衍射技術(shù)，因?yàn)槭窃谌芤褐杏^察。

顯微鏡是由一個(gè)透鏡或幾個(gè)透鏡的組合構(gòu)成的一種光學(xué)儀器，是人類進(jìn)入原子時(shí)代的標(biāo)志。主要用于放大微小物體成為人的肉眼所能看到的儀器。顯微鏡分光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡：光學(xué)顯微鏡是在1590年由荷蘭的楊森父子所首創(chuàng)。現(xiàn)在的光學(xué)顯微鏡可把物體放大1600倍，分辨的最小極限達(dá)0.1微米，國(guó)內(nèi)顯微鏡機(jī)械筒長(zhǎng)度一般是160mm。國(guó)內(nèi)主要生產(chǎn)廠家上海光學(xué)儀器廠等光學(xué)顯微鏡的種類很多，除一般的外，主要有： ①暗視野顯微鏡，一種具有暗視野聚光鏡，從而使照明的光束不從中央部分射入，而從四周射向標(biāo)本的顯微鏡。 ②熒光顯微鏡，以紫外線為光源，使被照射的物體發(fā)出熒光的顯微鏡。電子顯微鏡是在1931年在德國(guó)柏林由克諾爾和哈羅斯卡首先裝配完成的。這種顯微鏡用高速電子束代替光束。由于電子流的波長(zhǎng)比光波短得多，所以電子顯微鏡的放大倍數(shù)可達(dá)80萬(wàn)倍，分辨的最小極限達(dá)0.2納米。1963年開(kāi)始使用的掃描電子顯微鏡更可使人看到物體表面的微小結(jié)構(gòu)。 ■主要用途顯微鏡被用來(lái)放大微小物體的圖像。一般應(yīng)用于生物、醫(yī)藥、微觀粒子等觀測(cè)。（1）利用微微動(dòng)載物臺(tái)之移動(dòng)，配全目鏡之十字座標(biāo)線，作長(zhǎng)度量測(cè)。（2）利用旋轉(zhuǎn)載物臺(tái)與目鏡下端之游標(biāo)微分角度盤，配全合目鏡之址字座標(biāo)線，作角度量測(cè)，令待測(cè)角一端對(duì)準(zhǔn)十字線與之重合，然再讓另一端也重合。（3）利用標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)螺紋的節(jié)距、節(jié)徑、外徑、牙角及牙形等尺寸或外形。（4）檢驗(yàn)金相表面的晶粒狀況。（5）檢驗(yàn)工件加工表面的情況。（6）檢測(cè)微小工件的尺寸或輪廓是否與標(biāo)準(zhǔn)片相符

6，什么叫冰凍斷裂電鏡技術(shù)

冰凍斷裂又稱為冰凍斷裂復(fù)型技術(shù)，是一種制備透射電鏡樣品的方法，多用于觀察膜性結(jié)構(gòu)的內(nèi)部構(gòu)造。先用液氮（-196°C）快速冷凍生物樣品，防止形成冰晶。再將冷凍的樣品迅速轉(zhuǎn)移到冷凍裝置中，并迅速抽成真空。在真空條件下，用冰刀切割冰凍樣品，使樣品斷裂露出兩個(gè)表面。由于快速冷凍方法固定的生物樣品具有剛性和脆性。在對(duì)其施加外力后，組織即在結(jié)構(gòu)上結(jié)合最薄弱的部位發(fā)生“脆性斷裂”，這就是“冰凍斷裂”。對(duì)于生物膜，斷裂沿膜內(nèi)部疏水區(qū)發(fā)生，從而暴露出膜內(nèi)部結(jié)構(gòu)。利用金屬投影和復(fù)型技術(shù)，制備斷裂面的復(fù)型，然后將組織腐蝕掉，并用載網(wǎng)撈起復(fù)型膜，就可用電鏡來(lái)研究組織斷裂表面所顯示的細(xì)胞膜或生物膜內(nèi)部超微結(jié)構(gòu)。

冰凍斷裂又稱為冰凍斷裂復(fù)型技術(shù)，是一種制備透射電鏡樣品的方法，多用于觀察膜性結(jié)構(gòu)的內(nèi)部構(gòu)造。