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本文目錄一覽

1，高效液相的原理是什么
2，高效液相色譜法
3，高校液相色譜分離原理是什么
4，高效液相色譜分析法的原理是什么
5，高效液相色譜儀器原理是什么
6，液相和氣相色譜儀的原理和組成部件是什么

1，高效液相的原理是什么

利用液、固色譜原理，將組分用色譜柱事先分離，利用液、固分配原理，分離各組分，然后通過檢定器檢測，電腦記錄電信號，放大、計算，給出結(jié)果。

高效液相的原理是什么

2，高效液相色譜法

鹽析原理 :一些物質(zhì)比如蛋白質(zhì)在水溶液中的溶解度是由蛋白質(zhì)周圍親水基團與水形成水化膜的程度，以及蛋白質(zhì)分子帶有電荷的情況決定的。當(dāng)用中性鹽加入蛋白質(zhì)溶液，中性鹽對水分子的親和力大于蛋白質(zhì)，于是蛋白質(zhì)分子周圍的水化膜層減弱乃至消失。同時，中性鹽加入蛋白質(zhì)溶液后，由于離子強度發(fā)生改變，蛋白質(zhì)表面電荷大量被中和，更加導(dǎo)致蛋白溶解度降低，使蛋白質(zhì)分子之間聚集而沉淀。鹽析 1.鹽析一般是指溶液中加入無機鹽類而使溶解的物質(zhì)析出的過程。如：加濃（NH4）2SO4使蛋白質(zhì)凝聚的過程。 2.向某些蛋白質(zhì)溶液中加入某些無機鹽溶液后,可以使蛋白質(zhì)凝聚而從溶液中析出,這種作用叫作鹽析。 3.把動物脂肪或植物油與氫氧化鈉按一定比例放在皂化鍋內(nèi)攪拌加熱，反應(yīng)后形成的高級脂肪酸鈉、甘油、水形成混合物。往鍋內(nèi)加入食鹽顆粒，攪拌、靜置，使高級脂肪酸鈉與甘油、水分離，浮在液面。（該反應(yīng)用以制肥皂）

高效液相色譜法

3，高校液相色譜分離原理是什么

分離原理是根據(jù)被分離的組分在流動相和固定相中溶解度不同而分離，分離過程是一個分配平衡過程。高效液相色譜主要有4種，下面分別描述一下。1、液-固吸附色譜。固定相是固體吸附劑，它是根據(jù)物質(zhì)在固定相是吸附作用差異來分離的。吸附作用越強，K值越大保留時間越長。2、液-液分配色譜。顧名思義，它是將固定液涂在擔(dān)體上作為固定相的，它的分離原理與液液萃取的原理相同，從而服從分配定律。在固定液中溶解度大，K值大，保留時間長3、離子交換色譜。是離子交換樹脂上可電離的離子與具有相同電荷的被測離子可逆交換，由于被測離子在不同交換劑上具有不同的親和力而使子分離，親和力越強，K值越大保留時間越長。4、排阻色譜。固定相是多孔凝膠，內(nèi)布孔隙，分子大于孔隙的不能進入固定相，直接從表面流過，幾乎沒有保留，小分子的物質(zhì)可自由進出孔隙完全不受排阻，保留時間長。中等體積的分子介于兩種情況之間。分離順序只與分子的尺寸有關(guān)。對于反相色譜，極性越小的物質(zhì)，流動相的極性越大，保留時間越長。極性越小的物質(zhì)，流動相的極性越小，保留時間越短。對于極性大的物質(zhì)來說，流動相的極性對其保留時間影響較小，而正相色譜正好相反。高效液相色譜法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）又稱“高壓液相色譜”、“高速液相色譜”、“高分離度液相色譜”、“近代柱色譜”等。高效液相色譜是色譜法的一個重要分支，以液體為流動相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進入檢測器進行檢測，從而實現(xiàn)對試樣的分析。該方法已成為化學(xué)、醫(yī)學(xué)、工業(yè)、農(nóng)學(xué)、商檢和法檢等學(xué)科領(lǐng)域中重要的分離分析技術(shù)應(yīng)用。

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高校液相色譜分離原理是什么

4，高效液相色譜分析法的原理是什么

用一句話概括叫：相似相溶。具體的是這樣描述：由泵將儲液瓶中的溶劑吸入色譜系統(tǒng)，然后輸出，經(jīng)流量與壓力測量之后，導(dǎo)入進樣器。被測物由進樣器注入，并隨流動相通過色譜柱，在柱上進行分離后進入檢測器，檢測信號由數(shù)據(jù)處理設(shè)備采集與處理，并記錄色譜圖。廢液流入廢液瓶

色譜法的分析原理：分離技術(shù)。儀器原理：將混合物通過固定相吸附能力或與流動相的分配系數(shù)的不同等分離手段，達到組分分離的效果，然后將分離的組分通過檢測器，得到響應(yīng)，并將這響應(yīng)信號傳輸給信號輸出裝置。

分離原理：液—液分配色譜法　　(liquid-liquid partition chromatography)及化學(xué)鍵合相色譜(chemically bonded phase chromatography)　流動相和固定相都是液體。流動相與固定相之間應(yīng)互不相溶（極性不同，避免固定液流失），有一個明顯的分界面。當(dāng)試樣進入色譜柱，溶質(zhì)在兩相間進行分配。達到平衡時，服從于高效液相色譜計算公式：k=cs/cm=k*vm/vsa. 正相液— 液分配色譜法(normal phase liquid chromatography): 流動相的極性小于固定液的極性。b. 反相液— 液分配色譜法(reverse phase liquid chromatography): 流動相的極性大于固定液的極性。c. 液 — 液分配色譜法的缺點：盡管流動相與固定相的極性要求完全不同，但固定液在流動相中仍有微量溶解；流動相通過色譜柱時的機械沖擊力，會造成固定液流失。上世紀(jì)70年代末發(fā)展的化學(xué)鍵合固定相（見后），可克服上述缺點?，F(xiàn)在應(yīng)用很廣泛(70~80%）。液—固色譜法　　流動相為液體，固定相為吸附劑（如硅膠、氧化鋁等）。這是根據(jù)物質(zhì)吸附作用的不同來進行分離的。其作用機制是：當(dāng)試樣進入色譜柱時，溶質(zhì)分子 (x) 和溶劑分子(s)對吸附劑表面活性中心發(fā)生競爭吸附（未進樣時，所有的吸附劑活性中心吸附的是s)，可表示如下：xm nsa ====== xa nsm式中：xm--流動相中的溶質(zhì)分子；sa--固定相中的溶劑分子；xa--固定相中的溶質(zhì)分子；sm--流動相中的溶劑分子。當(dāng)吸附競爭反應(yīng)達平衡時：k=[xa][sm]/[xm][sa]式中：k為吸附平衡常數(shù)。[討論：k越大，保留值越大。]

5，高效液相色譜儀器原理是什么

高效液相色譜儀主要的組成部件為高壓輸液泵、進樣裝置、色譜柱、檢測器和色譜數(shù)據(jù)處理裝置。1.高壓輸液泵由于高效液相色譜所使用的色譜柱一般裝填小于10μm的固定相顆粒，故對流動相有較大的阻力，所以對于泵的耐壓有一定的要求。除此之外，對于輸液泵還有泵體材料耐化學(xué)腐蝕、輸出流量范圍寬、輸出流量穩(wěn)定等要求。高壓輸液泵可以分為恒壓泵和恒流泵兩大類。恒壓泵是指輸出恒定壓力的泵，當(dāng)系統(tǒng)阻力不變時可以保持恒定流量，但系統(tǒng)阻力發(fā)生變化時，就會影響到系統(tǒng)流量穩(wěn)定，因此現(xiàn)在基本已不使用。恒流泵是指可輸出恒定體積流量的泵，又分為注射型泵和往復(fù)式柱塞泵兩類。注射型泵由于其工作過程中需停流吸液以及價格昂貴等原因，目前基本不用于高效液相色譜儀中。往復(fù)式柱塞泵則可以提供低脈動的連續(xù)穩(wěn)定液流，廣泛應(yīng)用于各種商品化儀器中，并衍生出了雙柱塞往復(fù)式并聯(lián)泵、雙柱塞往復(fù)式串聯(lián)泵、雙柱塞獨立驅(qū)動的往復(fù)式串聯(lián)泵等多種設(shè)計。2.進樣裝置在HPLC分析中由于使用了高效顆粒填料和高壓的流動相，因而對樣品的進樣方式要求提高，需要使樣品在進入色譜柱頭時準(zhǔn)確地注人其上端填料的中心，形成集中的一點，以保證擴散效應(yīng)影響降到最低。為實現(xiàn)以上要求有兩種設(shè)計：停流進樣和六通閥進樣，但現(xiàn)在停流進樣技術(shù)已經(jīng)完全被簡單易用的六通閥進樣方式所取代。3.色譜柱色譜柱一般使用內(nèi)壁拋光的直型不銹鋼管作為柱管以獲得高柱效。當(dāng)使用粗內(nèi)徑短柱和細內(nèi)徑色潛柱時，需要注意柱外效應(yīng)所引起的色譜峰展寬，應(yīng)該盡量縮短進樣器至檢測器之間的連接管路，以獲得更小的柱外死體積。HPLC色譜柱裝填的固定相，其基體材料多為全多孔球形或無定形的硅膠顆粒，在高壓下使用勻漿裝柱法裝填，并在色譜柱兩端使用多孔不銹鋼燒結(jié)材料的過濾片以阻擋流動相中的微小機械雜質(zhì)進入，并防止固定相流失。4.檢測器檢測器主要用于檢測經(jīng)色譜柱分離后的組分濃度變化。常用的檢測器為紫外/可見光檢測器、熒光檢測器、示差折光檢測器、蒸發(fā)光散射檢測器等。5.色譜數(shù)據(jù)處理裝置高效液相色譜的分析結(jié)果數(shù)據(jù)現(xiàn)已廣泛使用色譜數(shù)據(jù)工作站來記錄和處理。色譜工作站基于微型計算機的硬件，可以實現(xiàn)如下功能：(1) 儀器操作參數(shù)的控制功能——色譜儀的所有可控參數(shù)，均可預(yù)先設(shè)定并保存記錄，在運行樣品時自動調(diào)用并傳輸至儀器。(2) 數(shù)據(jù)采集和處理功能——可通過計算機和儀器之間的數(shù)據(jù)傳輸接口自動采集色譜數(shù)據(jù)。并根據(jù)指定處理參數(shù)進行數(shù)據(jù)處理，提供色譜圖的相關(guān)積分數(shù)據(jù)，還可以選擇不同的標(biāo)準(zhǔn)計算方式來對樣品自動進行計算，得到定性或定量的結(jié)果。還具有計算柱效、繪制工作曲線等其他功能。

6，液相和氣相色譜儀的原理和組成部件是什么

液相色譜儀：色譜分離基本原理：在色譜法中存在兩相，一相是固定不動的，我們把它叫做固定相；另一相則不斷流過固定相，我們把它叫做流動相。色譜法的分離原理就是利用待分離的各種物質(zhì)在兩相中的分配系數(shù)、吸附能力等親和能力的不同來進行分離的。使用外力使含有樣品的流動相（氣體、液體）通過一固定于柱中或平板上、與流動相互不相溶的固定相表面。當(dāng)流動相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時，混合物中的各組分與固定相發(fā)生相互作用。由于混合物中各組分在性質(zhì)和結(jié)構(gòu)上的差異，與固定相之間產(chǎn)生的作用力的大小、強弱不同，隨著流動相的移動，混合物在兩相間經(jīng)過反復(fù)多次的分配平衡，使得各組分被固定相保留的時間不同，從而按一定次序由固定相中先后流出。與適當(dāng)?shù)闹髾z測方法結(jié)合，實現(xiàn)混合物中各組分的分離與檢測。高效液相色譜儀可分為“高壓輸液泵”、“色譜柱”、“進樣器”、“檢測器”、“餾分收集器”以及“數(shù)據(jù)獲取與處理系統(tǒng)”等部分。高壓輸液泵功能驅(qū)動流動相和樣品通過色譜分離柱和檢測系統(tǒng)；性能要求流量穩(wěn)定（±1），耐高壓（30～60Mpa），耐各種流動相：例如：有機溶劑、水和緩沖液；種類往復(fù)泵和隔膜泵。色譜柱功能分離樣品中的各個物質(zhì)；尺寸 10～30cm長，2～5mm內(nèi)徑的內(nèi)壁拋光的不銹鋼管柱；填料粒度 5 ～ 10μm ，高效微粒固定相；進樣器功能將待分析樣品引入色譜系統(tǒng)；種類 ①注射器，10Mpa以下，1～10μm微量注射器進樣 ②停流進樣 ③閥進樣，常用、較理想、體積可變，可固定 ④自動進樣器，有利于重復(fù)操作，實現(xiàn)自動化檢測器功能將被分析組在柱流出液中濃度的變化轉(zhuǎn)化為光學(xué)或電學(xué)信號；分類 ①示差折光化學(xué)檢測器 ②紫外吸收檢測器 ③紫外一可同分光光度檢測器 ④二極管陣列紫外檢測器 ⑤熒光檢測器 ⑥電化學(xué)檢測器餾分收集器功能如果所進行的色譜分離不是為了純粹的色譜分析，而是為了做其它波譜鑒定，或獲取少量試驗樣品的小型制備，餾分收集是必要的；方法 ①手工，少數(shù)幾個餾分，手續(xù)麻煩，易出差錯。 ②餾分收集器收集，比較理想，微機控制操作準(zhǔn)確。數(shù)據(jù)獲取和處理系統(tǒng) 功能把檢測器檢測到的信號顯示出來氣相色譜儀： GC主要是利用物質(zhì)的沸點、極性及吸附性質(zhì)的差異來實現(xiàn)混合物的分離，其過程如圖氣相分析流程圖所示。待分析樣品在汽化室汽化后被惰性氣體（即載氣，也叫流動相）帶入色譜柱，柱內(nèi)含有液體或固體流動相，由于樣品中各組分的沸點、極性或吸附性能不同，每種組分都傾向于在流動相和固定相之間形成分配或吸附平衡。但由于載氣是流動的，這種平衡實際上很難建立起來。也正是由于載氣的流動，使樣品組分在運動中進行反復(fù)多次的分配或吸附/解吸附，結(jié)果是在載氣中濃度大的組分先流出色譜柱，而在固定相中分配濃度大的組分后流出。當(dāng)組分流出色譜柱后，立即進入檢測器。檢測器能夠?qū)悠方M分的與否轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘枺娦盘柕拇笮∨c被測組分的量或濃度成正比。當(dāng)將這些信號放大并記錄下來時，就是氣相色譜圖了。（1）載氣系統(tǒng) 氣相色譜儀中的氣路是一個載氣連續(xù)運行的密閉管路系統(tǒng)。整個載氣系統(tǒng)要求載氣純凈、密閉性好、流速穩(wěn)定及流速測量準(zhǔn)確。（2）進樣系統(tǒng) 進樣就是把氣體或液體樣品速而定量地加到色譜柱上端。（3）分離系統(tǒng) 分離系統(tǒng)的核心是色譜柱，它的作用是將多組分樣品分離為單個組分。色譜柱分為填充柱和毛細管柱兩類。（4）檢測系統(tǒng) 檢測器的作用是把被色譜柱分離的樣品組分根據(jù)其特性和含量轉(zhuǎn)化成電信號，經(jīng)放大后，由記錄儀記錄成色譜圖。（5）信號記錄或微機數(shù)據(jù)處理系統(tǒng) 近年來氣相色譜儀主要采用色譜數(shù)據(jù)處理機。色譜數(shù)據(jù)處理機可打印記錄色譜圖，并能在同一張記錄紙上打印出處理后的結(jié)果，如保留時間、被測組分質(zhì)量分數(shù)等。（6）溫度控制系統(tǒng) 用于控制和測量色譜柱、檢測器、氣化室溫度，是氣相色譜儀的重要組成部分。